[发明专利]检测14种呼吸道感染病原菌的引物探针组合、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种检测14种呼吸道感染病原菌的引物探针组合，其特征在于，

检测肺炎克雷伯菌的正向引物如SEQ ID NO：1所示，反向引物如SEQ ID NO：2所示，探针如SEQ ID NO：3所示；

检测金黄色葡萄球菌的正向引物如SEQ ID NO：4所示，反向引物如SEQ ID NO：5所示，探针如SEQ ID NO：6所示；

检测流感嗜血杆菌的正向引物如SEQ ID NO：7所示，反向引物如SEQ ID NO：8所示，探针如SEQ ID NO：9所示；

检测铜绿假单胞菌的正向引物如SEQ ID NO：10所示，反向引物如SEQ ID NO：11所示，探针如SEQ ID NO：12所示；

检测鲍曼不动杆菌的正向引物如SEQ ID NO：13所示，反向引物如SEQ ID NO：14所示，探针如SEQ ID NO：15所示；

检测肺炎衣原体的正向引物如SEQ ID NO：16所示，反向引物如SEQ ID NO：17所示，探针如SEQ ID NO：18所示；

检测肺炎链球菌的正向引物如SEQ ID NO：19所示，反向引物如SEQ ID NO：20所示，探针如SEQ ID NO：21所示；

检测大肠杆菌的正向引物如SEQ ID NO：22所示，反向引物如SEQ ID NO：23所示，探针如SEQ ID NO：24所示；

检测肺炎支原体的正向引物如SEQ ID NO：25所示，反向引物如SEQ ID NO：26所示，探针如SEQ ID NO：27所示；

检测嗜麦芽假单胞菌的正向引物如SEQ ID NO：28所示，反向引物如SEQ ID NO：29所示，探针如SEQ ID NO：30所示；

检测阴沟肠杆菌的正向引物如SEQ ID NO：31所示，反向引物如SEQ ID NO：32所示，探针如SEQ ID NO：33所示；

检测嗜肺军团菌的正向引物如SEQ ID NO：34所示，反向引物如SEQ ID NO：35所示，探针如SEQ ID NO：36所示；

检测结核分枝杆菌的正向引物如SEQ ID NO：37所示，反向引物如SEQ ID NO：38所示，探针如SEQ ID NO：39所示；

检测耐甲氧西林黄色葡萄球菌的正向引物如SEQ ID NO：40所示，反向引物如SEQ IDNO：41所示，探针如SEQ ID NO：42所示。

2.包含权利要求1所述的检测14种呼吸道感染病原菌的引物探针组合的试剂盒。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测分为4组，分别为：

第一组检测金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌；

第二组检测鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌和肺炎衣原体；

第三组检测大肠杆菌、嗜麦芽假单胞菌、肺炎支原体和阴沟肠杆菌；

第四组检测耐甲氧西林黄色葡萄球菌、嗜肺军团菌、结核分枝杆菌。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中的试剂包括：4组引物探针组合液、TAKRA酶Mix和DEPC水。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，4组中的任一单组所述引物探针组合液中含有的任一引物的浓度均为5μmol/L、任一探针的浓度均为2.5μmol/L。

6.权利要求2-5中任一项所述的试剂盒在检测/辅助检测14种呼吸道感染病原菌中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用的具体步骤是取待测样本提取待测样本核酸后分别与试剂盒中的试剂混合制成4组反应体系，振荡混匀，离心，进行PCR扩增反应，获得4组扩增曲线图和CT值，再根据所得4组扩增曲线图和CT值判断待测样本呈阳性/阴性。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，单组所述反应体系为待测样本核酸4μL、TAKRA酶Mix 10μL、单组引物探针组合液2μL，补DEPC水至20μL。