[发明专利]CPS-I抗体及其用途

说明书

本发明涉及CPS‑I抗体及其用途。本发明涉及抗CPS‑I抗体或其抗原结合片段，所述抗CPS‑I抗体至少含有一个选自以下序列的CDR：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。实验结果表明，本发明抗体能够应用于针对CPS‑I的免疫反应。

技术领域

本发明涉及免疫领域，具体涉及CPS-I抗体及其用途。

背景技术

氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ(carbamoyl phosphate synthetase I, CPS-I)存在于肝线粒体中，以游离的氨作为氨基供体合成氨甲酰磷酸，参与鸟氨酸循环最终合成代谢产物尿素。CPS-I在肝细胞癌的癌组织与癌旁组织中存在差异表达，这对于后期评价癌组织有着重要的意义。目前，在针对肝细胞及肿瘤的检测过程当中，包括小肠粘膜中局灶、胃和食道的肠化生中，HepPar1单克隆抗体均发挥了重要的检测作用。HepPar1抗原即氨基甲酰磷酸合成酶1（CPS-I）的鸟氨酸循环酶，定位于线粒体。

此外，如果氨基甲酰磷酸合成酶1异常，也会导致体内对氨合成尿素的异常，所以会进一步引起患者肝性脑病发生的可能性。对于有基础性肝病，如慢性肝炎患者。如果进一步形成肝炎、肝硬化，或者是由于肝恶性肿瘤而进一步引起患者肝脏疾病终末期，都会形成患者氨基甲酰磷酸合成酶1的异常。

目前，CPS-I常用的体外免疫检测方法为免疫组织化学(IHC)法。特异性结合人CPS-I的单克隆抗体，其特异性和亲和力决定了检测方法的灵敏度和特异性。现临床中使用的CPS-I体外免疫检测抗体种类较少、且多为国外试剂公司长期占据，且灵敏度、特异性有待进一步提高，同时该试剂价格昂贵。目前常用的克隆号为OCH1E5，为国外1993年开发出的抗体。该抗体可以在肝细胞及相关癌症的检测过程中有着良好的效果，但是其免疫原为Anne E. Wennerberg通过福尔马林固定的失败的移植肝脏机械破碎后免疫，其方法开发具有高度随机性。开发出一种新的适应病理诊断的CPS1抗体，可解决现有CPS1抗体临床使用的选择性不强、价格昂贵等缺陷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种CPS-I的单克隆抗体及其应用，实验结果表明，通过单克隆抗体制备工艺技术针对CPS-I成功得到高亲和力，高特异性以及多应用场景等特点的单克隆抗体。

本发明提供抗CPS-I抗体或其抗原结合片段，所述抗CPS-I抗体至少含有一个选自以下序列的CDR：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6。

在一些实施方案中，所述抗CPS-I抗体含有如SEQ ID NO:1所示的HCDR1、如SEQ IDNO:2所示的HCDR2和如SEQ ID NO:3所示的HCDR3，和/或含有如SEQ ID NO:4所示的LCDR1、如SEQ ID NO:5所示的LCDR2和如SEQ ID NO:6所示的LCDR3。

在一些实施方案中，所述抗CPS-I抗体的VH的氨基酸序列如SEQ ID NO: 7所示，和/或VL的氨基酸序列如SEQ ID NO: 8所示。

在一些实施方案中，所述抗CPS-I抗体的重链恒定区和/或轻链恒定区为鼠源的。

在一些实施方案中，本发明任一实施方案所述的抗CPS-I抗体为单克隆抗体、嵌合抗体、鼠源抗体。

本发明还提供一种重组蛋白，具有：本文任意实施方案所述的抗体或其抗原结合片段，和任选的协助表达和/或纯化的标签序列。

在一些实施方案中，所述的标签序列选自下组：6×His标签、GGGS序列、FLAG标签。

在一些实施方案中，所述的重组蛋白包括双特异性抗体、嵌合抗体。

 本发明还提供一种多核苷酸，所述多核苷酸：