[发明专利]一种微流控芯片与数字化荧光定量PCR扩增仪有效
申请号: | 202111594061.1 | 申请日: | 2021-12-23 |
公开(公告)号: | CN114308155B | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 杨志达;陈雨非;宋佳;魏鲁明;张子榕;杨晓丹;陈炳钊;云涛;邓宇 | 申请(专利权)人: | 广东工业大学 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;B01L3/02;C12N15/10;C12Q1/686 |
代理公司: | 深圳市创富知识产权代理有限公司 44367 | 代理人: | 高冰 |
地址: | 510006 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微流控 芯片 数字化 荧光 定量 pcr 扩增 | ||
1.一种微流控芯片,其特征在于,所述芯片由上层芯片与下层芯片组合而成,其中所述上层芯片设置有预混液的溶液进样口、细胞组织样液进样口、洗涤溶液进样口、洗脱溶液进样口、第一废液收集腔、油相收集腔、去油通道与混合流道;所述下层芯片设置有多通道液滴生成流道、第二废液收集腔与液滴收集腔;所述预混液的溶液进样口的流道、所述细胞组织样液进样口的流道、所述洗涤溶液进样口的流道、所述洗脱溶液进样口的流道分别与所述混合流道连通;所述混合流道的出口与所述去油通道连通,所述去油通道的流道出口与所述第一废液收集腔的流道连通,所述油相收集腔连通于所述第一废液收集腔与所述去油通道的流道出口之间;所述多通道液滴生成流道与所述废液收集腔的流道连通,所述多通道液滴生成流道的出口依次连接有所述第二废液收集腔、所述液滴收集腔;
所述混合流道的截面为正反Z型首尾相连的结构;所述多通道液滴生成流道设有八通道,为T型结构;所述预混液的溶液进样口包括硅油、磁珠、裂解液混合样液。
2.一种根据权利要求1所述的微流控芯片的应用,其特征在于,将微流控芯片应用于数字化荧光定量PCR扩增仪。
3.一种使用如权利要求1所述的微流控芯片的数字化荧光定量PCR扩增仪,其特征在于,具有微流控芯片,以及所述PCR扩增仪包括荧光检测光路系统、激光发生器、压力泵与微流控芯片夹片;其中,所述荧光检测光路系统由凸透镜、滤光片、二向色镜、硅光电倍增管组成。
4.一种如权利要求3所述的微流控芯片的数字化荧光定量PCR扩增仪的扩增方法,其特征在于,所述方法包括加入的样品进入预混液的溶液进样口,利用磁珠法核酸提取法实现细胞的裂解,并由磁珠吸附核酸分子,经洗脱液洗脱磁珠提取,进入后方去油通道,保证进入液滴包裹区域时仅保留所需要的核酸片段;再进入后多通道液滴生成流道,利用多通道液滴生成流道的T型结构,连续相和分散相在T形口处汇聚,分散相逐渐进入主干道,在连续相的剪切下,“断裂”,形成液滴;所生成的液滴进入最后方的液滴收集腔室内;待液滴生成完毕后,PCR扩增仪进入恒温扩增状态,直至扩增完毕,荧光检测光路则在扩增完毕后对液滴收集腔室内的液滴进行检测,从而实现PCR由预处理至扩增、检测的全过程。
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