[发明专利]一种降低样本基质干扰的磁珠稀释液及免疫检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种降低样本基质干扰的磁珠稀释液及免疫检测试剂盒。该磁珠稀释液，包括：20‑100mM缓冲液、0.1％‑1％非离子表面活性剂、0.5％‑3％蛋白保护剂、0.02％‑0.5％防腐剂、100‑1000mM无机盐、水。本发明在磁珠稀释液中添加大量盐增加稀释液的离子强度来降低抗体与蛋白的结合能力，使血液血浆中的杂蛋白无法通过弱相互作用于抗体，降低可能的非特异性抗原‑抗体结合，从而降低样本基质效应带来的影响，从而提高检测结果的准确性；本发明的检测方法不需要对样本进行预处理，也不需要对包被过抗原或抗体的磁性小球进行额外的长时间封闭处理，操作简单、耗时短。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其是涉及一种降低样本基质干扰的磁珠稀释液及其制备方法。

背景技术

免疫诊断是基于抗原抗体特异性反应，对人体内物质进行检测并获取临床诊断信息，进而判断人体疾病的一种检测技术，是医学检验的基本技术之一。免疫诊断主要有胶体金、酶联免疫(ELISA)和化学发光(CLIA)三种技术平台。化学发光(CLIA)是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的抗原抗体反应相结合，用于检测抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术，是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。相对于胶体金和酶联免疫，化学发光更为灵敏、快速、稳定、特异性强、重现性好，也更易实现高通量和自动化，因此化学发光将是免疫诊断领域的大势所趋。目前市场认可度较高的化学发光厂家一般是国外厂家，如罗氏、雅培、贝克曼等，国产化学发光的认可度不够高。因此将国产化学发光项目质量做好是我们的目标。

基质是指样品中被分析物以外的组分，常常对分析物的分析过程有显著的干扰，影响分析结果的准确性。在化学发光项目开展过程中很容易遇到样本基质干扰的问题。专利CN113391060A中公开了一种血液样本处理剂，通过预处理样本的方式减少血浆样本的基质干扰，使免疫测定结果与对比方法一致。该方法需要对血液样本进行预处理或使用特殊处理的采血管，操作繁杂，增加了测定时间。专利CN201811579298.0中使用含有聚氧乙基高分子化合物对包被过抗原或抗体的磁性小球进行1-10小时封闭，以降低免疫测定中不同采血管之间的基质效应，该方需要对包被后的磁性小球进行后处理，增加了磁珠的标记时间和复杂度，对磁珠标记的人员提出了更高的操作要求。

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术不足，提出一种降低样本基质干扰的磁珠稀释液及免疫检测试剂盒，解决现有技术中降低样本基质干扰的方法操作复杂、耗时长的技术问题。

本发明的第一方面提供一种磁珠稀释液，包括：20-100mM缓冲液、0.1％-1％非离子表面活性剂、0.5％-3％蛋白保护剂、0.02％-0.5％防腐剂、100-1000mM无机盐、水。

本发明的第二方面提供一种化学发光免疫检测试剂盒，包括：M试剂、R试剂、发光底物液和校准品；其中，M试剂为包被抗体M的磁珠试剂，R试剂为连接抗体R的酶标记试剂，且M试剂通过将包被抗体M的磁珠用本发明第一方面提供的磁珠稀释液稀释得到。

本发明的第三方面提供一种化学发光免疫检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

M试剂的制备：将磁珠清洗活化后，加入抗体M和偶联缓冲液进行偶联反应，然后加入封闭缓冲剂封闭，再用磁珠稀释液稀释得到M试剂；

R试剂的制备：将抗体R和酶分别活化后混合，进行酶联反应，得到酶标抗体复合物，再用R稀释液稀释得到R试剂。

发光底物液的制备；

校准品的制备：将抗原用校准品稀释液配制成不同浓度得到校准品。

与现有技术相比，本发明的有益效果包括：