[发明专利]一种腺病毒载体重组新冠病毒B.1.429变异株疫苗及其应用

说明书

本发明公开了一种以人5型复制缺陷型腺病毒为载体的新冠变异株疫苗。所述疫苗以E1、E3联合缺失的复制缺陷型人5型腺病毒为载体，基因组中整合有经优化设计的新型冠状病毒B.1.429变异株抗原基因（Ad5‑nCoV‑B.1.429）。该疫苗在宿主细胞中可以有效表达保护性抗原蛋白。使用该疫苗单次免疫即可激发针对新冠野生株以及B.1.351、B.1.617.2变异株的抗体反应。与2019野生型新型冠状病毒疫苗联用，疫苗加强免疫后可以激发强烈且广谱的新冠病毒变异株中和抗体反应。无论用作单独免疫，还是同新冠野生株疫苗联用作异型加强免疫时，该疫苗均能激发较为广谱的中和抗体反应，具有一定的应用优势，可作为疫苗候选株，用于应对持续蔓延的新冠变异株疫情。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体而言，涉及一种重组新型冠状病毒B.1.429变异株疫苗。

背景技术

自2020年初发现新冠病毒原始毒株以来，变异株层出不穷。由于新冠病毒为RNA病毒，其长链RNA基因组结构使其在进化过程中较易发生突变或基因重组，从而产生变异株。RNA病毒在宿主间的长时间流行和传播会增大免疫逃逸变异株甚至“超级毒株”出现的可能。截至2021年11月，B.1.1.7（Alpha）、B.1.351（Beta）、P.1（Gamma）和B.1.617.2（Delta）变异株病毒被世界卫生组织或美国疾病预防控制中心归类为“值得关注的变异”株（Variantsof Concern，VOC）。此外，起源于美国的B.1.429（Epsilon）也曾被计入“VOC”病毒株，随着上述4种变异株流行优势的逐渐扩大，B.1.429变异株的关注度逐渐降低。

以上“VOC”突变株中，B.1.1.7变异株对恢复期和疫苗接种后的中和抗体影响最小；P.1变异株显示出中等的中和抗性，中和抗体滴度降低大约3-7倍；B.1.351变异株增加了对恢复期和接种疫苗的血清样品的中和抗性，大约降低7-42倍；mRNA疫苗BNT162b2和mRNA-1273针对B.1.617.2变异株下降约2-3倍。与中和抗体水平下降一致，多种疫苗的保护效力在变异株流行地区显著下降。重组蛋白疫苗NVX-CoV2373在英国对野生型SARS-CoV-2毒株引起的预防COVID-19的有效性为96%，而在南非的HIV阴性试验参与者中，其有效性降低到51%，感染者中大多数是B.1.351变异株。在卡塔尔，BNT162b2对野生毒株的有效性为95%，而对B.1.1.7变异株的有效性约为90%，对B.1.351变异株的有效性约为75%，对B.1.617.2变异株的有效率为51.9%。Ad26.COV2.S在美国（主要是野生型毒株）对中度至重度疾病的有效性为72%，在南非降至52%，其中约94.5%的病例感染了B.1.351变异株。ChAdOx1 nCoV-19疫苗在英国针对野生毒株的保护效力为84%，针对B.1.1.7变异株的保护效率为75%，但是在B.1.351变异株流行的南非地区，其对轻到中度疾病只有10%的保护效力。

B.1.429变异株显示出对恢复期和接种疫苗的血清样品的中等中和抗性。与其它变异株相比，其刺突蛋白中具有最少的突变位点，包括位于受体结合区的L452R位点，位于S1区的D614G位点，以及位于S1 NTD的 S13I和W152C位点。其中，D614G在B.1.1.7、B.1.351、P.1和B.1.617.2等流行优势株中普遍存在，L452R位点在B.1.617.1（Kappa）和后期覆盖率接近100%的B.1.617.2变异株中同时存在，二者均显著增强新冠病毒变异株传染性。

申请人在新冠变异株研究中发现，虽然B.1.429变异株在疫情流行中的优势逐渐丧失，但是其免疫原性较强。相比其他型别新冠变异株，其无论用作单独免疫，还是同已经上市的腺病毒载体新冠野生株疫苗联用作异型加强免疫时，该疫苗均能激发较为广谱的中和抗体反应，对新冠野生株及B.1.1.7、B.1.351、P.1、B.1.617.1和B.1.617.2等突变株均具有较好的中和能力，对特定变异株的中和能力可以接近或超过以该特定变异株制成的疫苗的免疫原性。在新冠变异株疫情持续流行的背景下，具有一定的应用潜力。

发明内容