[发明专利]一种微流控芯片及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种微流控芯片在检测新型冠状病毒或/和流感病毒核酸中的应用，其特征在于，所述微流控芯片包括：底层芯片、顶层芯片以及连接组件；

其中，所述底层芯片包括：设于所述底层芯片正中处的中心孔(1)、若干第一逶迤通道(2)、若干第一反应微室(3)、若干第一连接通道(41)以及若干第二连接通道(42)；所述顶层芯片包括：若干第三连接通道(43)、若干第二逶迤通道(5)以及若干第二反应微室(6)；所述中心孔(1)于圆周上设有若干出液口，每个所述中心孔(1)的出液口各自与一个所述第一逶迤通道(2)的进液口连通，每个所述第一逶迤通道(2)的出液口各自与一个所述第一反应微室(3)的进液口连通，每个所述第一反应微室(3)的出液口各自与一个所述第一连接通道(41)的进液口连通，每个所述第一连接通道(41)的出液口各自与一个所述第二连接通道(42)的进液口连通，每个所述第二连接通道(42)的出液口各自与一个所述第三连接通道(43)的进液口连通，每个所述第三连接通道(43)的出液口各自与一个所述第二逶迤通道(5)的进液口连通，每个所述第二逶迤通道(5)的出液口各自与一个所述第二反应微室(6)的进液口连通，每个所述第二反应微室(6)远离所述第二逶迤通道(5)的一端设有试剂进口(7)；

其中，所述连接组件包括：若干贯穿所述顶层芯片并与所述底层芯片连接的螺丝(8)、设于所述第一连接通道(41)与所述第二连接通道(42)连通处的若干控制阀(9)以及设于所述第二连接通道(42)与所述第三连接通道(43)连通处的若干密封圈(10)；所述螺丝(8)与所述顶层芯片可拆卸连接，所述螺丝(8)与所述底层芯片可拆卸连接，且所述螺丝(8)与所述控制阀(9)相邻；所述控制阀(9)设于所述顶层芯片与所述底层芯片之间；所述密封圈(10)设于所述顶层芯片与所述底层芯片之间；

所述微流控芯片检测新型冠状病毒或/和流感病毒核酸的步骤包括：

S1、拧松所述螺丝(8)后，依次将含样本的LAMP反应体系以及矿物油加入所述中心孔(1)中，使所述含样本的LAMP反应体系填充所述第一反应微室(3)，并使所述矿物油充满所述第一逶迤通道(2)；将CRISPR/Cas12a反应体系通过所述试剂进口(7)加入所述第二反应微室(6)中；

S2、拧紧所述螺丝(8)，并以透明的微流控胶带密封所述中心孔(1)、所述试剂进口(7)以及气孔(11)，将所述微流控芯片置于恒温加热器上，于65℃恒温40分钟后，拧松所述螺丝(8)，并移除所述透明的微流控胶带，向所述中心孔(1)中加入矿物油，以将LAMP反应产物转移至所述第二反应微室中；

S3、拧紧所述螺丝(8)，并以透明的微流控胶带密封所述中心孔(1)以及所述试剂进口(7)，将所述微流控芯片置于恒温加热器上，于37℃恒温15分钟后，以470nm的蓝光照射所述微流控芯片，透过蓝光滤光片即可记录所产生的荧光，裸眼即可观察结果；

其中，当所述螺丝(8)被拧紧时，所述控制阀(9)在所述顶层芯片与所述底层芯片的挤压下发生形变，进而封堵所述第二连接通道(42)与所述第三连接通道(43)的连通口；当所述螺丝(8)被拧松时，所述控制阀(9)的形状复原，从而所述第二连接通道(42)与所述第三连接通道(43)的连通恢复；

其中，所述LAMP反应体系包括：

其中，所述CRISPR/Cas12a反应体系包括：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述第一逶迤通道(2)的长度为35.0mm-40.0mm，宽度为0.1mm-0.4mm，深度为0.1mm-0.4mm，体积为1.0μL-2.0μL；

所述第一反应微室(3)的长度为3.0mm-9.0mm，宽度为1.0mm-4.0mm，深度为0.1mm-1.0mm，体积为3.0μL-9.0μL；

所述第一连接通道(41)、所述第二连接通道(42)、所述第三连接通道(43)以及所述第二逶迤通道(5)的总长度为20.0mm-30.0mm，宽度均为0.1mm-0.4mm，深度均为0.1mm-0.4mm，总体积为0.5μL-1.5μL；

所述第二反应微室(6)的长度为3.0mm-9.0mm，宽度为1.0mm-4.0mm，深度为1.5mm-2.0mm，体积为20.0μL-25.0μL。