[发明专利]CXCL14作为生物标志物在结核病诊断中的用途

说明书

本发明属于生物技术领域，提供CXCL14作为生物标志物在结核病诊断中的用途。本发明旨在为结核病的诊断提供一种全新的生物标志物，CXCL14可制备或筛选结核分枝杆菌感染诊断试剂，不仅可用于结核病的诊断，还能区分活动性结核病和非活动性结核病。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及CXCL14作为生物标志物在诊断结核病中的用途。

背景技术

结核病(tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起的慢性传染性疾病，目前全球Mtb感染者占总人口的四分之一。2020年WHO TBreport报道，全球估计每年约1000万人感染Mtb，140万人死于TB。中国是30个高负担结核病国家之一，结核病发病率高。因此，必须控制结核病的进展，并进行早期预防、诊断和治疗。

如果诊断正确及时，结核病是一种可治愈的感染。但是，延迟诊断或不当治疗，则可能导致复发或升级为耐多药/广泛耐药结核。

肺外结核病(包括肠结核、骨结核、关节结核、脑结核、结核性脑膜炎、肾结核、淋巴结核等)，由于症状不典型，不易收集组织标本进行检测，易误诊，延误治疗。此外，结核病与艾滋病合并感染，很难通过常规方法进行诊断；儿童结核病的检测也有其自身的一系列问题，不易诊断。因此，亟需研发新型的结核诊断生物标志物。

目前，结核病诊断的主要依据是临床表现和实验室检查。临床体征和症状仅在5-10％的感染个体中发展。结核病主要累及下呼吸道系统，但也可以侵犯肺外组织，包括淋巴结、肾脏、骨骼、关节、中枢神经系统等或导致播散性疾病。影像学检查是一种筛查工具，但只能作为结核病诊断辅助工具，不能提供任何病因学诊断。实验室检查方面，痰涂片抗酸染色，是一种广泛使用的检测抗酸分枝杆菌方法，然而，该方法无法将结核分枝杆菌与其他抗酸杆菌区分开来，并且敏感性低，需要提高痰液中的分枝杆菌含量(5000-10000CFU/mL)。分离培养方法，灵敏度高，但培养周期长，从而延误治疗。2007年，世卫组织批准了液体培养系统用于结核病的鉴定和药敏试验，其检测分枝杆菌及其抗细菌药物的耐药性方面与传统的L-J培养方法一样有效，但该方法仅限于分枝杆菌的初期识别，并且需要额外的测试来鉴定结核分枝杆菌。结核菌素皮肤试验(TST)，也称为Mantoux 试验或纯化蛋白衍生物(PPD)试验，原理是依赖于人体对结核菌素抗原产生细胞免疫从而介导的迟发性超敏反应，通过在注射区域48至72小时后测量硬结(≥ 5mm被认为是阳性)，通过硬结直径来检测个体的免疫反应。由于PPD包含多种结核分枝杆菌抗原的复杂混合物，而这些抗原并非结核分枝杆菌的特异性，有些甚至由卡介苗(BCG)疫苗株和非结核分枝杆菌表达，因此该试验的特异性较差。 QuantiFERON-TB Gold(QFT)或IGRA是一种γ干扰素(IFN-γ)释放试验，用于测量细胞介导的免疫反应，IGRA检测的是之前对结核分枝杆菌抗原的免疫敏感性，并不直接表明宿主中生物体的存在或生存能力，不能预测疾病进展。在过去的几十年里，已经提出了许多分子方法，目前正在使用核酸探针和基因扩增技术诊断分枝杆菌疾病，即:聚合酶链反应(PCR)、链位移扩增(SDA)、转录介导扩增 (TMA)、分支杆菌噬菌体报告系统、寡核苷酸连接扩增、q-β复制酶扩增。虽其特异性强，灵敏度高，快速简便，但其影响因素很多，容易造成假阳性和假阴性。目前，许多结核分枝杆菌感染病例在临床上仍未得到诊断或被延迟诊断，在这种情况下，迫切需要我们去寻找更加灵敏特异的诊断标志物。

外周血中含有一系列与免疫相关的细胞，如T细胞、B细胞、单核细胞、巨噬细胞等，血浆内蕴含着丰富的蛋白质，通过血液循环到达全身各组织、参与生命过程。在外周血单个核细胞和血浆中筛选出结核病中异常表达的分子，作为生物标志物，并研制相应的辅助诊断试剂盒，将有力推动结核病的早期诊断、监测复发等，具有重要的临床应用价值。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供CXCL14作为生物标志物在诊断结核病中的应用，用于解决现有技术中结核病诊断方法敏感性不高、特异性不高或耗时等问题。