[发明专利]一种基于水凝胶的核酸传感平台的制备方法及检测方法

权利要求书

1.一种基于水凝胶的核酸传感平台的制备方法，其特征在于，所述方法具体包括如下步骤：

S1）制备超疏水基底；

S2）在超疏水基底上修饰制得超亲水点；

S3）将水凝胶锚定在S2)得到超亲水点上，经紫外光照后,即生成PEG水凝胶微球阵列；

S4）将前体混合物与S3）得到PEG水凝胶微球阵列混合，即得到水凝胶的核酸传感平台。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述S1）的具体步骤为：

S1.1）将正硅酸乙酯 溶解在乙醇中，与浓盐酸溶液混合搅拌3-5小时，并在室温下陈化4天得到酸催化溶胶；

S1.2）再将SiO₂ 分散在乙醇中搅拌1.5-3 小时，再加入酸催化硅溶胶得到SiO₂悬浮液；

S1.3）采用超声清洗基底，吹干，将基底采用S1.2）得到SiO₂悬浮液进行浸涂，然后置于1H,1H,2H,2H-全氟癸基三氯硅烷溶液中，浸泡一定的时间进行修饰，加热固化即得到超疏水基底。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述S1.1）中的TEOS、乙醇和浓盐酸溶液比例为：1: 520: 4200；

所述S1.2）中SiO₂ 与乙醇的质量比为1:40；

所述S1.3）中SiO₂悬浮旋涂次数不少10次，浸泡时间为25-35分钟。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述S1.3）中的热固化的工艺为：用无水乙醇冲洗后在75-85℃加热固化15-25分钟。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3）的具体工艺为：

S3.1）配置水凝胶预聚液，将得到水凝胶预聚液滴入超亲水点中；

S3.2）置于波长为365nm的 紫外光照射8-15s，形成PEG水凝胶微球阵列。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述S3.1）中的水凝胶预聚液包括：聚乙二醇、聚乙二醇二丙烯酸酯、去离子水、丙烯酸酯-聚乙二醇-羧基水溶液和 2-羟基-2-甲基-苯丙酮乙醇溶液，五者之间的体积比为：4:2:2:1:1。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述聚乙二醇的分子量为200；聚乙二醇二丙烯酸酯的分子量为700；丙烯酸酯-聚乙二醇-羧基水溶液的浓度为20mM，丙烯酸酯-聚乙二醇-羧基的分子量为3400；2-羟基-2-甲基-苯丙酮乙醇溶液的浓度为655mM。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S4）的具体包括以下步骤：

在室温下将1.5-2μL的前体混合物滴加到水凝胶微球上，混合18-23分钟，即得到水凝胶的核酸传感平台。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述前体混合物中包含捕获探针和氧化石墨烯， 其中，所述氧化石墨烯含量为80-100mg/mL,所述捕获探针含量为100nM/mL。

10.一种采用如权利要求1-9任意一项所述的制备方法制备得到水凝胶的核酸传感平台用于DNA荧光检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

首先，将目标DNA用Tris-HCl缓冲液稀释溶解，溶解后的DNA溶液先在90-100℃下加热3-8分钟，然后逐渐冷却至室温；

然后将不同浓度的目标DNA溶液加入到水凝胶的核酸传感平台上，用荧光显微镜检测荧光信号并绘制荧光关系曲线图，即得到检测结果。