[发明专利]一种影响高山美利奴羊剪毛量的SNP分子标记及其应用有效
| 申请号: | 202111547607.8 | 申请日: | 2021-12-16 |
| 公开(公告)号: | CN114214428B | 公开(公告)日: | 2022-09-02 |
| 发明(设计)人: | 袁超;卢曾奎;郭婷婷;刘建斌;岳耀敬;杨博辉;牛春娥;孙晓萍;李建烨 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人: | 毛婷 |
| 地址: | 730050 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 影响 高山 美利奴羊 剪毛 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种检测与高山美利奴羊剪毛量相关的SNP分子标记的试剂在检测高山美利奴羊剪毛量中的应用,其特征在于,所述SNP分子标记位于国际绵羊基因组Oar_v4.0版本第5号染色体上第20065540位点的碱基处;突变碱基为G或A。
2.一种检测与高山美利奴羊剪毛量相关的SNP分子标记的试剂在提高高山美利奴羊剪毛量的育种中的应用,其特征在于,所述SNP分子标记位于国际绵羊基因组Oar_v4.0版本第5号染色体上第20065540位点的碱基处;突变碱基为G或A。
3.如权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述SNP分子标记碱基为G时,基因型为GG;所述SNP分子标记碱基为A时,基因型为GA或AA;所述基因型AA的高山美利奴羊剪毛量显著大于基因型GA或GG。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述试剂包括用于扩增含有所述SNP分子标记的核苷酸序列的引物对。
5. 如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述含有SNP分子标记的核苷酸序列如SEQID NO.1所示,所述的SNP分子标记位于第28位。
6.一种用于扩增如权利要求4所述的含有SNP分子标记的核苷酸序列的特异性引物对在用于检测高山美利奴羊剪毛量,或用于提高高山美利奴羊剪毛量的育种中的应用,其特征在于,所述的引物对序列为:
F:5'-ACTGGGTTGGGATGTTTA-3';R:5'-ATCTGAGTGAGTGTTTCG-3'。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,实现检测高山美利奴羊剪毛量,或提高高山美利奴羊剪毛量的育种的方法包括:
(1)提取高山美利奴羊血液基因组DNA为模板DNA;
(2)利用特异性引物对,将步骤(1)获得的待测高山美利奴羊血液的基因组DNA进行PCR扩增,获得PCR扩增产物;
(3)将步骤(2)获得的PCR扩增产物纯化,进行基因分型检测,所述SNP分子标记碱基为G时,基因型为GG;所述SNP分子标记碱基为A时,基因型为GA或AA;所述基因型AA的高山美利奴羊剪毛量显著大于基因型GA或GG。
8. 如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增体系25μL:金牌Mix 22μL,上、下游引物各1μL,模板DNA 1μL。
9. 如权利要求7所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增程序:98℃ 2min;98℃ 10s,54℃ 10s,72℃10s,共35个循环;72℃延伸2min。
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