[发明专利]柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用

说明书

本发明提供了柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用，属于农药技术领域。本发明提供了式I结构所示的柠檬苦素类化合物；本发明的柠檬苦素类化合物具有良好的预防作用，且其抗TMV活性与减少烟草花叶病毒外壳蛋白(TMV‑CP)的表达和TMV‑CP基因的复制及增加相关防御酶活力(苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶、天然多酚氧化酶)有关。同时下调NtHsp70‑1和NtHsp70‑261的表达，进一步说明柠檬苦素类化合物抑制TMV的感染还与NtHsp70‑1和NtHsp70‑261含量减少有关。

技术领域

本发明涉及农药技术领域，尤其涉及柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用。

背景技术

复叶地黄连Munronia henryi Harms又名矮陀陀，小地黄连，属楝科(Meliaceae)地黄连属(Munronia)植物，约6种，产中南部、西南部及海南岛。生于海拔1000～1400米的林下湿润处，在贵州、广西、云南等地均有分布。复叶地黄连全株均可入药，用于跌打损伤，风湿性关节炎，胃痛，气胀腹痛，感冒发热，疟疾。但是，迄今为止，现有技术中未见有从复叶地黄连中提取柠檬苦素类化合物的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供柠檬苦素类化合物、制备方法及其作抗烟草花叶病毒药物的应用。本发明提供的柠檬苦素类化合物的抗烟草花叶病毒活性好，对，烟草花叶病毒具有良好的预防作用。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种柠檬苦素类化合物，具有式I所示的结构：

所述R₁和R₂独立地为-OH或-OAc。

优选地，所述R₁为-OH，R₂为-OAc。

优选地，所述R₁为-OAc，R₂为-OH。

本发明还提供了上述技术方案所述柠檬苦素类化合物的制备方法，包括以下步骤：

将乙醇水溶液和复叶地黄连全株进行回流提取，收集提取液；

对所述提取液进行浓缩，得到浸膏；

将所述浸膏重悬于水中，得到粗提液；

采用乙酸乙酯对所述粗提液进行萃取，得到乙酸乙酯萃取物；

对所述乙酸乙酯萃取物通过第一梯度洗脱进行正相硅胶柱色谱分离，所述第一梯度洗脱的程序为：依次使用90vol％石油醚-10vol％乙酸乙酯、70vol％石油醚-30vol％乙酸乙酯、50vol％石油醚-50vol％乙酸乙酯、30vol％石油醚-70vol％乙酸乙酯、70vol％二氯甲烷-30vol％甲醇、50vol％二氯甲烷-50vol％甲醇、30vol％二氯甲烷-70vol％甲醇进行洗脱，获得7个部分的洗脱液，依次命名为Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5、Fr6和Fr7；

对所述Fr6通过第二梯度洗脱进行小孔树脂色谱分离，所述第二梯度洗脱的程序为：依次采用体积分数为30％的甲醇水溶液、体积分数为50％的甲醇水溶液、体积分数为70％的甲醇水溶液、体积分数为90％的甲醇水溶液和无水甲醇进行洗脱，收集获得6个部分的洗脱液，依次命名为Fr6A、Fr6B、Fr6C、Fr6D、Fr6E和Fr6F；

对所述Fr6C通过第三梯度洗脱进行C18反相硅胶柱色谱分离，所述第三梯度洗脱的程序为：依次采用体积分数为50％的甲醇水溶液、体积分数为60％的甲醇水溶液、体积分数为70％的甲醇水溶液、体积分数为80％的甲醇水溶液和无水甲醇进行洗脱，收集获得5个部分的洗脱液，依次命名为Fr6C-1、Fr6C-2、Fr6C-3、Fr6C-4和Fr6C-5；