[发明专利]一种二色波罗蜜种苗快速繁殖方法

权利要求书

1.一种二色波罗蜜种苗快速繁殖方法，其特征在于包括以下步骤:

（1）二色波罗蜜嫩枝经表面灭菌后剪成茎段，接入芽诱导培养基中诱导产生不定芽，芽诱导培养基为：MS + 6-BA 2.0～3.0 mg/L + ZT 0.1～0.5 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8；

所述茎段先在温度30±2℃下暗培养7天，再转入光照强度800～1200 lux，光照时间10±1 h/d的光下培养；

（2）将步骤（1）中获得的不定芽，接入芽增殖培养基中进行继代增殖培养，增殖培养基为：MS + 6-BA 0.5～1.5 mg/L + ZT 0.1～0.2 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8；

（3）将步骤（2）中增殖的芽，接入壮苗培养基中进行壮苗培养，壮苗培养基为：MS + 6-BA 0.2～0.4 mg/L + NAA 0.1～0.5 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8；

（4）剪取步骤（3）中生长健壮、高3～4cm的单芽接入生根培养基中诱导生根，生根培养基为：1/2 MS + NAA 0.5～1.5 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8；

（5）将生根试管苗在荫蔽度为70～85%的大棚里炼苗10～15天后，洗净培养基移栽于经甲基托布津消毒的火烧土:中沙:泥炭土为3:2:1的混合基质中，成活率为75.5～80.0%。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述芽诱导培养基为：MS + 6-BA2.5 mg/L + ZT 0.2 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述增殖培养基为：MS + 6-BA1.0 mg/L + ZT 0.1 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）所述壮苗培养基为：MS + 6-BA0.4 mg/L + NAA 0.2 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）所述生根培养基为：1/2 MS + NAA1.0 mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0 g/L、蔗糖30 g/L，pH为5.8。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

所述步骤（2）、（3）和（4）中培养条件为：光照强度800～1200 lux，光照时间10±1 h/d，温度 28±2℃。