[发明专利]GTFB突变体及其在制备一系列具有不同抗水解能力异麦芽多糖中的应用

权利要求书

1. 4,6-α-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于，所述突变体是以氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示的4,6-α-葡萄糖基转移酶为亲本，将其第346位、348位、399位发生取代，所述突变体为以下(1)~(6)任一所述：

(1) 将亲本的第348位取代为亮氨酸；

(2) 将亲本的第348位取代为异亮氨酸；

(3) 将亲本的第346位取代为苏氨酸，并将第348位取代为亮氨酸；

(4) 将亲本的第346位取代为苏氨酸，并将第348位取代为异亮氨酸；

(5) 将亲本的第346位取代为苏氨酸，并将第348位取代为缬氨酸；

(6) 将亲本的第346位取代为苏氨酸，将第348位取代为苏氨酸，并将第399位取代为丙氨酸。

2.编码权利要求1所述4,6-α-葡萄糖基转移酶突变体的基因。

3.含有权利要求2所述基因的表达载体。

4.表达权利要求1所述4,6-α-葡萄糖基转移酶突变体或含有权利要求2所述基因的宿主细胞。

5.制备异麦芽多糖的方法，其特征在于，利用权利要求1所述4,6-α-葡萄糖基转移酶突变体以淀粉为底物，制备异麦芽多糖。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，具体步骤为：

(1) 将淀粉加水调制成15~25%的悬浊液，并升温至60~80℃糊化；

(2) 将步骤(1)糊化后的反应液冷却至30~45℃调节pH值6.5~7.0，同时添加普鲁兰酶20~40U/g底物和4,6-α-葡萄糖基转移酶突变体3000~4000U/g底物，放入恒温式水浴摇床，30~40℃反应不少于20 h；

(3) 将步骤(2)得到的反应液升温至95℃、10-20 min灭酶；

(4) 将反应产物经离心后取上清，喷雾干燥，最终得到淡黄色粉末成品。

7.权利要求1所述4,6-α-葡萄糖基转移酶突变体，或权利要求2所述基因，或权利要求4所述宿主细胞在生产异麦芽多糖中的应用。