[发明专利]银屑病关节炎的诊断标记物及其用途

说明书

本发明提供与银屑病关节炎相关的miRNA标记物，检测所述miRNA标记物的试剂及其用途。

技术领域

本发明属于分子辅助诊断领域，具体涉及在银屑病关节炎诊断中的应用。

背景技术

银屑病关节炎(Psoriatic arthritis，PsA)影响多达30％的银屑病患者，导致了病人的生活质量下降。PsA涉及多种部位，包括外周和中轴型关节炎、附着点炎、指端炎和指甲疾病。银屑病关节炎的早期干预对预防功能丧失和永久性残疾很重要。然而，皮肤症状通常先于关节炎，使得PsA的确诊平均时间延迟了5年。因此，用于检测预警银屑病关节炎患者，将其从寻常型银屑病(PsO)中区分出来的生物标志物对皮肤科医生来说非常重要。

近年来，人们对细胞外囊泡(extracellular vesicle，EV)，比如外泌体所携带的循环微小核糖核酸(miRNA)的重要性越来越感兴趣。循环中的miRNA在细胞间的远近通讯中起着重要作用，并能调节基因表达。外泌体循环miRNA丰富、稳定且高度保守。它们是几种人类疾病的新型诊断和预后生物标志物，如过敏性疾病、心血管疾病、和癌症。由于miRNAs的分布因种族而异，不同人种之间与疾病相关的miRNA仍需要进一步研究。

发明内容

本发明的目的是提供检测miRNA的试剂及其在银屑病关节炎诊断中的用途。通过与寻常型银屑病病人相比较的方法，将银屑病关节炎病人从全体银屑病病人中识别出来进行预警，为早期干预提供条件。

本发明第一方面提供一种分离的来自哺乳动物的RNA，包含miR-191-3p或其功能片段或其pri-miRNA或pre-miRNA，或与它们具有至少70％相同性的变体。

在一个或多个实施方案中，所述RNA包含SEQ ID NO:1所示序列或其功能片段或其pri-miRNA或pre-miRNA，或与它们具有至少70％相同性的变体。

本发明第二方面提供检测RNA的引物或探针，所述RNA包含miR-191-3p或其功能片段或其pri-miRNA或pre-miRNA，或与它们具有至少70％相同性的变体，所述引物与所述RNA杂交并且能扩增出所述RNA或其功能片段或它们的对应DNA，所述探针与所述RNA或其功能片段或它们的对应DNA杂交。

在一个或多个实施方案中，所述RNA包含SEQ ID NO:1所示序列或其功能片段或其pri-miRNA或pre-miRNA，或与它们具有至少70％相同性的变体。

在一个或多个实施方案中，所述引物包含SEQ ID NO:3所述的特异扩增引物或与其具有至少90％序列相同性的变体。进一步地，所述引物任选还包含反转录引物和/或通用扩增引物。反转录引物具有SEQ ID NO:2所述的序列或与其具有至少90％序列相同性的变体。通用扩增引物具有SEQ ID NO:4所述的序列或与其具有至少90％序列相同性的变体。

本发明第三方面提供记载有RNA的序列的介质，所述RNA包含miR-191-3p或其功能片段或其pri-miRNA或pre-miRNA，或与它们具有至少70％相同性的变体。所述介质用于与RNA测序数据比对以确定所述RNA的存在或含量。

在一个或多个实施方案中，所述RNA包含SEQ ID NO:1所示序列或其功能片段或其pri-miRNA或pre-miRNA，或与它们具有至少70％相同性的变体。

在一个或多个实施方案中，所述介质是印有所述序列的卡片，例如纸质、塑料、金属、玻璃卡片。

在一个或多个实施方案中，所述介质是存储有所述序列和计算机程序的计算机可读介质，当所述计算机程序被处理器执行时，实现下述步骤：将样品的RNA测序数据与所述序列比较，从而获得所述样品中含所述序列的RNA的存在和水平。