[发明专利]一种连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶及其应用有效
申请号: | 202111528899.0 | 申请日: | 2021-12-14 |
公开(公告)号: | CN114181923B | 公开(公告)日: | 2022-10-18 |
发明(设计)人: | 常耀光;陈广宁;申晶晶;薛长湖;李嘉靖;李羚;韩瑾;孙孟辉;王玉明 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12P19/04;C12P19/00;C12P19/12;C12P19/14 |
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地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 连续 型内切 聚糖 及其 应用 | ||
1.一种连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶,其氨基酸序列如序列SEQ ID NO. 1所示。
2.权利要求1中所述的连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶的编码基因,其特征在于:其核苷酸序列为SEQ ID NO. 2及可翻译出SEQ ID NO. 1的所有序列。
3.如权利要求1所述的连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶,其特征在于:特异性切割岩藻聚糖中的α-1,3糖苷键。
4.权利要求1中所述的连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶在连续型内切降解岩藻聚糖中的应用,沿岩藻聚糖主链连续催化,产生具有特定结构的寡糖。
5.一种应用权利要求1中所述的连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶定向制备特定结构岩藻寡糖的方法,其特征在于具体包括如下步骤:
1)岩藻聚糖溶液的配制:称取岩藻聚糖溶于缓冲溶液,制备得到岩藻聚糖底物溶液;
2)寡糖定向制备:向岩藻聚糖溶液中加入连续型内切-1,3-岩藻聚糖酶液混合进行反应,反应时间为2-12h,反应温度为25-40℃,反应后使用沸水浴灭活5-10min终止反应,得到酶解寡糖溶液。
6.如权利要求5所述的定向制备特定结构岩藻寡糖的方法,其特征在于:步骤(2)得到的寡糖在产物中的质量百分比为70%以上。
7.如权利要求5所述的定向制备特定结构岩藻寡糖的方法,其特征在于:将步骤(2)得到的寡糖溶液经过一步层析纯化,得到特定结构的岩藻寡糖纯品,纯度为95%以上。
8.如权利要求5所述的定向制备特定结构岩藻寡糖的方法,其特征在于:所述步骤1)中缓冲溶液pH为6.0-9.0。
9.如权利要求5所述的定向制备特定结构岩藻寡糖的方法,其特征在于:所述步骤2)中的反应温度为35℃。
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