[发明专利]一种利用鳖甲提取物制备的FMT供体菌液及方法和应用

权利要求书

1.一种利用鳖甲提取物制备的FMT供体菌液，其特征在于：原料包括鳖甲提取物-GAM培养基、PBS缓冲液和粪菌液；在每6mL的FMT供体菌液中，GAM培养基的固含量为0.10～0.14g，鳖甲提取物为0.16～0.24g，粪菌液的固含量为0.0225～0.0825g。

2.根据权利要求1所述的一种利用鳖甲提取物制备的FMT供体菌液，其特征在于：在每6mL的FMT供体菌液中，GAM培养基的固含量为0.12g，鳖甲提取物为0.2g，粪菌液的固含量为0.05g。

3.根据权利要求1所述的一种利用鳖甲提取物制备的FMT供体菌液，其特征在于：FMT供体菌液的pH值为7.35～7.45。

4.一种利用鳖甲提取物制备FMT供体菌液的方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：向GAM培养基中加入鳖甲提取物溶液，再加入PBS缓冲液，得到混合液；

步骤二：混合液经过氧气置换处理，得到鳖甲提取物-GAM培养基；

步骤三：将粪菌液接种至鳖甲提取物-GAM培养基中，在厌氧条件下37℃培养48h以上，得到FMT供体菌液；

其中每6mL的FMT供体菌液中，GAM培养基的固含量为0.10～0.14g，鳖甲提取物为0.16～0.24g，粪菌液的固含量为0.0225～0.0825g。

5.根据权利要求4所述的一种利用鳖甲提取物制备FMT供体菌液的方法，其特征在于：步骤一采用的GAM培养基是采用改良GAM肉汤药品加超纯水配成的，浓度为50～70g/L；步骤一采用的鳖甲提取物溶液的质量浓度为8.0～12.0％；PBS缓冲液的pH值为7.35～7.45。

6.根据权利要求4所述的一种利用鳖甲提取物制备FMT供体菌液的方法，其特征在于：置换处理是在厌氧箱中置换氧气11～13h。

7.根据权利要求4所述的一种利用鳖甲提取物制备FMT供体菌液的方法，其特征在于：步骤三采用的粪菌液的制备步骤包括：

先取新鲜健康供体粪便样品加入PBS缓冲液混匀形成粪悬液，然后过滤，将得到的滤液进行离心处理，获得沉淀物；将沉淀物用PBS溶液配成质量浓度为4.5～5.5％的粪菌液。

8.根据权利要求4所述的一种利用鳖甲提取物制备FMT供体菌液的方法，其特征在于：步骤三中培养48～96h；厌氧条件是在N₂、H₂或者CO₂气氛中培养；还包括以下步骤：

步骤四：将步骤三所得的FMT供体菌液，在4500Xg、4℃离心30分钟，去除上清液；

步骤五：用生理盐水将离心沉淀重悬后直接用于FMT，或制备成胶囊后-80℃保藏备用。

9.如权利要求1-8任意一项所述的FMT供体菌液在制备粪菌移植药物中的应用，其特征在于：所述药物包括所述FMT供体菌液经离心处理和生理盐水重悬后制得的菌液型或胶囊型。

10.如权利要求1-8任意一项所述的FMT供体菌液在体外促进益生菌增殖中的应用，其特征在于：所述益生菌包括双歧杆菌、乳杆菌、粪厌氧棒杆菌和粪杆菌属。