[发明专利]一种基于UPLC-TQ-MS/MS的干姜质量评价方法

说明书

本发明涉及一种基于UPLC‑TQ‑MS/MS的干姜质量评价方法。本发明将干姜硫熏前后的差异标志成分6‑姜磺酸与其他干姜中主含的、具有显著生物活性的、涵盖多类型结构的9个化合物（6‑姜酚，6‑姜烯酚，6‑脱氢姜二酮，8‑姜酚，8‑姜烯酚，8‑脱氢姜二酮，10‑姜酚，10‑姜烯酚，10‑脱氢姜二酮）同时构建UPLC‑TQ‑MS/MS质量分析方法，实现一个分析方法快速区分硫熏及非硫熏干姜，同时定量评价干姜的质量水平。该方法专属性强，准确可靠，为干姜安全使用和质量稳定提供了技术支持，并为中药材/硫熏中药材质量评价提供可借鉴的研究方法。

技术领域

本发明属于中药质量分析领域，具体涉及一种基于UPLC-TQ-MS/MS的干姜质量评价方法。

背景技术

干姜作为常用的中药材，为姜科姜属多年生草本植物姜的干燥根茎，作为第一批列入国家“按照传统既是食品又是中药材物质目录”的中药材，干姜是使用历史最为悠久、使用范围最广泛的“药食同源”中药之一；在氧化应激、炎症、肿瘤、糖尿病及胃肠道疾病的治疗方面都表现出显著功效，具有重要的医疗和食疗保健价值；同时也是重要经济植物，在中国产地覆盖辽阔且广为流通。

然而，近年来市场上出现硫熏干姜的报道屡见不鲜，而一系列研究发现含硫熏蒸会导致药材化学和生物活性的变化，因此存在安全隐患。但目前《中国药典》只对干姜中[6]-姜酚作为含量指标，无法对硫熏和非硫熏做到有效监控。前期研究表明干姜硫熏后，可形成姜磺酸类成分，其中6-姜磺酸被认为是主要差异标志物，但由于缺少对照化合物无法确认主要差异标志物的正确结构，也无法明确干姜硫熏后其含量。此外，目前虽有文献采用液质联用方法对干姜进行含量分析，但存在分析时间长、定量成分类型单一、无法区分市场上的干姜及硫熏干姜等现实问题。

发明内容

本发明的目的在于解决现有液质联用技术中干姜质量分析时间长、定量成分类型单一、无法有效区分干姜及硫熏干姜的技术问题，从而提供了基于UPLC-TQ-MS/MS的干姜质量评价方法，所述评价方法能够快速区分硫熏及非硫熏干姜，同时定量评价干姜的质量水平，专属性强，准确可靠。

为了解决上述技术问题，本发明是通过如下技术方案得以实现的。

本发明提供了一种基于UPLC-TQ-MS/MS的干姜质量评价方法，包括如下步骤：

（1）制备混合对照品标准溶液；

（2）制备供试品溶液；

（3）采用UPLC-TQ-MS/MS测定混合对照品及供试品溶液中化学成分，从而对干姜的质量情况进行分析评价。

作为优选地，步骤（1）中所述混合对照品标准溶液的制备方法具体如下：分别精密称取6-姜酚，6-姜烯酚，6-脱氢姜二酮，8-姜酚，8-姜烯酚，8-脱氢姜二酮，10-姜酚，10-姜烯酚，10-脱氢姜二酮，6-姜磺酸适量，加入一定量甲醇溶解稀释，分别配制成起始浓度为20.0μg/ml至800.0 μg/ml的标准储备溶液，相应地通过混合稀释制备含10个定量成分的混合对照品标准溶液。

作为优选地，步骤（2）中所述供试品溶液的制备方法具体如下：

精密称取干姜样本，加入70%（v/v）甲醇水溶液超声提取30 min，提取液13225  g超高速离心10 min，得上清液，70%（v/v）甲醇水稀释至100 μg/mL，得到供试品溶液。

作为优选地，步骤（3）所述UPLC-TQ-MS/MS中超高效液相色谱仪的色谱条件为：采用Waters BEH Shield RP18柱作为固定相；以各含0.1%甲酸的乙腈（B）-水（A）作为流动相进行梯度洗脱。