[发明专利]以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒及其判读方法

权利要求书

1.以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒，其特征在于，包括试剂：p16/Ki-67一抗工作混合液、羊抗鼠/兔二抗工作混合液、TOP2A/MCM2一抗工作液、DAB工作混合液、RED工作混合液和苏木素。

2.根据权利要求1所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒，其特征在于，p16/Ki-67一抗工作混合液包括抗体稀释液、p16一抗浓缩液和Ki-67一抗浓缩液；TOP2A/MCM2一抗工作液包括抗体稀释液、TOP2A一抗浓缩液和MCM2一抗浓缩液；羊抗鼠/兔二抗工作混合液包括羊抗鼠二抗工作液和羊抗兔二抗工作液；DAB工作混合液包括DAB染色底物、DAB染色缓冲液；RED工作混合液包括AP-red显色缓冲液、AP-red色原浓缩液。

3.根据权利要求1或2所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，制备两张子宫颈脱落细胞制片，分别为细胞制片1和细胞制片2。

采用p16/Ki-67一抗工作混合液、羊抗鼠/兔二抗工作混合液、DAB工作混合液、RED工作混合液、苏木素对细胞制片1进行p16/Ki-67免疫组织化学染色；

采用TOP2A/MCM2一抗工作液、羊抗鼠/兔二抗工作混合液、RED工作混合液、苏木素对细胞制片2进行MCM2免疫组织化学染色；

结合染色结果、细胞数量和细胞核面积，得出判定结果，具体如上表所示。

4.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，配制p16/Ki-67一抗工作混合液：首先将抗体稀释液和p16一抗浓缩液混合，再加入到Ki-67一抗浓缩液中混匀。

5.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，配制TOP2A/MCM2一抗工作液：将抗体稀释液和TOP2A一抗浓缩液加入到MCM2一抗浓缩液中混匀。

6.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，配制羊抗鼠/兔二抗工作混合液：将羊抗鼠二抗工作液加入羊抗兔二抗工作液中混合。

7.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，配制DAB工作混合液：DAB染色底物和DAB染色缓冲液混匀得到。

8.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，配制RED工作混合液：AP-red显色缓冲液和AP-red色原浓缩液混匀得到。

9.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，对细胞制片1进行p16/Ki-67免疫组织化学染色：首先将p16/Ki-67一抗工作混合液添加到切片1上；然后在细胞制片1上再羊抗鼠/兔二抗工作混合液，最后依次添加DAB工作混合液、RED工作混合液和苏木素进行染色。

10.根据权利要求3所述的以p16/Ki-67、TOP2A/MCM2为靶标的宫颈癌检测试剂盒的判读方法，其特征在于，对细胞制片2进行TOP2A/MCM2免疫组织化学染色：首先将TOP2A/MCM2一抗工作混合液添加到细胞制片2上，然后在细胞制片2上再添加羊抗鼠/兔二抗工作混合液，最后依次添加DAB工作混合液、RED工作混合液和苏木素进行染色。