[发明专利]一种降解农药残留的复合微生物菌剂的生产方法

权利要求书

1.一种降解农药残留的复合微生物菌剂的生产方法，其特征在于，所述复合微生物菌剂由枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆进行菌液态发酵、离心浓缩、高温雾化干燥的产物按4:1的比例复配而成，其中枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×10⁹ cfu/g，胶冻样芽孢杆菌的有效活菌数≥5×10⁷ cfu/g。

2.权利要求1所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）液态发酵：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌分别进行液态发酵，得到大量的微生物菌体；

（2）离心浓缩：对发酵后的产物进行高效离心，获得高含量低体积的浓缩微生物菌剂；

（3）高温雾化干燥：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的浓缩液分别进行130℃干燥，获得含水量在10%以下的微生物菌剂产品；

（4）复配混合：将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌的干燥产物按4:1的比例混合复配，并添加辅料，复混后高温枯草芽孢杆菌的有效活菌数≥2×10⁹ cfu/g，胶冻样的有效活菌数≥5×10⁷ cfu/g。

3.如权利要求2所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌液态发酵的制备采用以下步骤：

将枯草芽孢杆菌菌株从斜面接种至一级种子培养基中培养2-3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液，将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；

所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%-2%，pH为7.0-7.5；摇瓶培养基配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠；

所述发酵条件为温度为37-37.5℃；

所述发酵罐培养基的配方为玉米淀粉1.8kg，牛肉膏0.18kg，蛋白胨0.8kg， 酵母粉0.64kg，磷酸二氢钾0.24kg，磷酸氢二钾0.12kg，硫酸镁0.032kg，乙酸钠0.2kg，柠檬酸钠0.16kg，碳酸钙0.24kg，硫酸锰8g，硫酸亚铁16g，消泡剂0.24kg，pH 7.0-7.5，发酵条件温度为37.0-37.5℃。

4.如权利要求2所述复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述胶冻样芽孢杆菌的制备采用以下步骤：

将胶冻样芽孢杆菌菌株从斜面分别接种至培养基中培养2-3 d，挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落，挑选其中部分菌落接种到摇瓶培养基中培养得到菌液,将菌液接入发酵罐中继续培养，获得枯草芽孢杆菌的液态发酵产物；

所述种子培养基相同，配方为0.5%酵母提取物，1%胰蛋白胨，1%氯化钠，琼脂1.5%-2%，pH为7.0-7.5；摇瓶培养基配方为蔗糖20（g/L），尿素0.1（g/L），氯化钠0.2（g/L）磷酸氢二钾0.2（g/L）硫酸锰0.2（g/L）碳酸钙5（g/L）pH7.0-7.2；

所述发酵罐培养基配方为玉米淀粉10（g/L），黄豆粉5（g/L），蔗糖2（g/L），硫酸铵1.8（g/L），磷酸氢二钾2（g/L），硫酸镁0.6（g/L），酵母粉1.5（g/L），蛋白胨1（g/L），牛肉膏1（g/L），碳酸钙5（g/L），pH7.0-7.2，发酵温度为30-30.5℃。

5.如权利要求2所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，将枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌分别离心浓缩后可得菌含量高、体积少的浓缩液，这样可大大提高高温雾化干燥效率，减少人工和电力资源的浪费，高温雾化在130℃进行干燥时不仅有效去除水分，而且能降低菌剂的损失率。