[发明专利]用于鉴定白色肺形侧耳黔侧02的分子标记及特异性引物对有效
| 申请号： | 202111501544.2 | 申请日： | 2021-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN114058733B | 公开（公告）日： | 2022-07-12 |
| 发明（设计）人： | 张邦喜;王晓敏;杜慕云;杨珍;陈旭;朱森林;陈波;张钦语;唐玲;杨仁德 | 申请（专利权）人： | 贵州省土壤肥料研究所（贵州省生态农业工程技术研究中心）（贵州省农业资源与环境研究所） |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 皋吉甫 |
| 地址： | 550006 *** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 鉴定 白色 侧耳 02 分子 标记 特异性 引物 | ||
1.一种用于鉴定白色肺形侧耳（Pleurotus pulmonarius(Fr.) Quél.）菌株黔侧02的分子标记，其特征在于，所述的分子标记为一个DNA片段；所述的DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述菌株黔侧02的保藏编号为CCTCC NO：2021259。
2.权利要求1所述的分子标记在鉴定白色肺形侧耳（Pleurotus pulmonarius(Fr.) Quél.）菌株黔侧02上的应用；所述菌株黔侧02的保藏编号为CCTCC NO：2021259。
3.用于扩增权利要求1所述的分子标记的特异性引物对，其特征在于，所述的引物对由SEQ ID No：2和SEQ ID No：3所示的核苷酸序列组成。
4.权利要求3所述的特异性引物对在鉴定白色肺形侧耳（Pleurotus pulmonarius(Fr.) Quél.）菌株黔侧02上的应用；所述菌株黔侧02的保藏编号为CCTCC NO：2021259。
5.一种检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括权利要求3所述的特异性引物对。
6.权利要求5所述的检测试剂盒在鉴定白色肺形侧耳（Pleurotus pulmonarius(Fr.)Quél.）菌株黔侧02上的应用；所述菌株黔侧02的保藏编号为CCTCC NO：2021259。
7.利用权利要求1所述的分子标记鉴定白色肺形侧耳菌株黔侧02的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）、从菌丝或子实体中提取基因组DNA；
（2）、以步骤（1）中提取的基因组DNA为底物，以SEQ IDNo：2和SEQ IDNo：3所示的核苷酸序列为引物进行PCR扩增，得扩增产物；
（3）电泳检测；如果所得PCR扩增产物为大小为1519bp的DNA片段，即为菌株黔侧02。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，其步骤（2）中所述的PCR扩增的反应体系为：总体积20μL：20-50ng/μL的DNA模板1μL，10×带有Mg2+的Buffer 2μL，2.5mM dNTP 0.5μL，5U/μl EasyTaq酶 0.2μL，0.2μM引物各 0.5μL，加双蒸水至20μL；所述的PCR扩增的反应条件为：预变性95℃ 5min；94℃ 30s，57℃ 30s，72℃ 90s，30个循环；72℃延伸10min。
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