[发明专利]基于纯化胎牛真皮的组织工程支架材料及其制备方法

权利要求书

1.基于纯化胎牛真皮的组织工程支架材料的制备方法，其特征是，步骤如下：

S1、原料准备：以胎牛皮为原料，并对所述胎牛皮进行第一次清洗和第一次称重；然后对第一次清洗后的胎牛皮进行腌制，并将腌制后的胎牛皮进行堆置冷藏；在堆置冷藏7天之后进行翻堆和二次腌制，获得胎牛皮一；

将所述胎牛皮一进行第一次去肉后，进行第二次称重和第二次清洗，获得胎牛皮二；然后将所述胎牛皮二进行第二次去肉、第三次称重和第三次清洗，获得胎牛皮三；

S2、脱脂：将步骤S1中所述的胎牛皮三放入超声波转鼓一中，向所述超声波转鼓一中加入纯碱、平平加O和常温自来水，并使所述超声波转鼓一转动40～180min；然后向所述超声波转鼓一中加入碱性脂肪酶Greasex 10L，并使所述超声波转鼓一转动60～240min后，确认脱脂效果达到要求后，将所述超声波转鼓一中的液体排出，获得胎牛皮四；

其中，所述的胎牛皮三、纯碱、平平加O、常温自来水和碱性脂肪酶Greasex10L的重量比为100：2～3：0.1～0.6：80～200：0.05～0.6；

S3、脱毛：对步骤S2所述的胎牛皮四进行第四次清洗，并在第四次清洗后进行脱毛，所述脱毛工序包括脱毛第一阶段和脱毛第二阶段；

a.脱毛第一阶段：向超声波转鼓一中加入热水调温，控制超声波转鼓一中的水量和内温和pH值，所述pH值为7.5～8.5；然后再向所述超声波转鼓一中加入脱毛复合酶，并使超声波转鼓一进行多次重复间歇清洗，确认所述胎牛皮四的针毛全部脱净后，将所述超声波转鼓一中的液体排出；向所述超声波转鼓一中加入热水，闷水洗10min后将水排出；

b.脱毛第二阶段：向所述超声波转鼓一中加入硫氢化钠、30％液碱和平平加O，并使所述超声波转鼓一转动30～120min；然后向所述超声波转鼓一中加入自来水，并使超声波转鼓一再转动60～180min；

其中，所述的胎牛皮四、脱毛复合酶、硫氢化钠、30％液碱、平平加O和自来水的重量比为100：2～6：1.0～3.0：0.1～0.5：0.2：100～300；

待绒毛全部脱净后，使所述超声波转鼓一进行间歇转动，每小时转动10min，重复4～6次后，停鼓过夜；次日，启动所述超声波转鼓一转动30min后，将所述超声波转股中的液体排出，获得胎牛皮五；将所述胎牛皮五进行第五次清洗、第三次去肉和第四次称重，获得胎牛皮六，出鼓；

S4、去碱、蓬松化：将胎牛皮六置入超声波转鼓二中，向所述超声波转鼓二中加入热水调温，控制所述超声波转鼓二中的水量和内温，并向所述超声波转鼓二中加入乳酸；所述超声波转鼓二转动30～120min后，向其中加入纯碱；使超声波转鼓二转动10～30min后，向其中加入1.0～3.0％的碱性脂肪酶Greasex 10L和0.05～0.25％的胰酶，并使所述超声波转鼓二转动20～80min，获得皮坯一；确认所述皮坯一的状态达到要求后，将所述超声波转鼓二中的液体排出；然后对所述皮坯一进行第六次清洗和第七次清洗，获得皮坯二；

其中，所述的胎牛皮六、乳酸、纯碱和胰酶的重量比为100：3.2～4.0：0.1～0.5：0.05～0.25；

S5、改性：调好所述超声波转鼓二内的超纯水量和内温，将所述皮坯二放入所述超声波转鼓二中，并向其中加入植物多酚复合交联剂，使所述超声波转鼓二转动120～480min，获得皮坯三；确认所述皮坯三达到全透要求后，加入甲酸溶液，转动40min后，使超声波转鼓二中液体的pH值为4.5～5.0，获得皮坯四；取样检测所述皮坯四的收缩温度不低于70℃后，将所述超声波转鼓二中的液体排出；

其中，所述的植物多酚复合交联剂的成分包括没食子酸1份、槲皮素0.5份、单宁酸0.5份、亚硫酸氢钠0.5份和水10.5份；

S6、静置离心脱水：将所述皮坯四进行第八次清洗，将第八次清洗后的皮坯四从超声波转鼓二中取出，并静置24～48h；然后将静置后的皮坯四置于离心机中，转动10～30min，除去水分，获得皮坯五；

S7、剖层：将皮坯五在精密剖层机上剖层得到皮片一，所述皮片一的厚度为0.3～0.6mm；然后将所述皮片一进行冷冻干燥，获得皮片二，所述皮片二的水分含量为5～10％；

S8、成型、包装和辐照：在超净工作台上，将皮片二裁剪成型，获得产品；将所述产品进行包装，并对包装后的产品进行辐照消毒灭菌，即得到成品。