[发明专利]一种快速提取病毒RNA试剂盒及提取方法

权利要求书

1.一种快速提取病毒RNA试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括盒体和独立放置在盒体内部的裂解结合液、漂洗液、洗脱液和吸附柱，其中

所述裂解结合液包括如下物质的量浓度组分：2-4M的异硫氰酸胍、0.2-2 M的硫氰酸胺、0.01-0.1 M的三羟甲基氨基甲烷、0.001-0.05 M的亚氨基二琥珀酸四钠、0.005-0.01M抗坏血酸钠、0.001-0.002M乙基苯基聚乙二醇、0.006M十二烷基硫酸钠；

所述漂洗液包括0.02-0.2 M的氯化钠和0.37-0.61M乙醇；

所述洗脱液包括0.01-0.1 M的Tris-HCl缓冲液和0.00002-0.002M焦碳酸二乙酯。

2.一种利用权利要求1所述的快速提取病毒RNA试剂盒的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）、取样，将待提取的病毒样本保存液吸取150μL置于1.5mLEP管内，并加入150μL裂解结合液，漩涡混合均匀10秒；

2）、裂解，向步骤1）中得到的样本加入500μL漂洗液，漩涡混合均匀10秒，将混合后样本倒入吸附柱中，13000 rpm离心30秒，倒掉过柱后的废液；

3）、洗涤，再向吸附柱中加入500μL洗脱液，13000rpm离心30秒，倒掉下层废液，重复洗涤一次；将倒掉废液的吸附柱在13000 rpm空离心1分钟，将残留的乙醇彻底甩干，打开吸附柱管盖，室温放置1分钟，挥发残留乙醇；

4）、洗脱，将吸附柱芯放入到1.5mL无RNA酶的收集管中，向吸附柱芯中加入20~50μL无RNA酶水，室温放置1分钟，13,000rpm离心1分钟，洗脱液即为提取的病毒RNA，-80℃冷冻保存。

3.如权利要求2所述的一种病毒RNA的提取方法，其特征在于：可适用于口腔拭子样本和血液样本的病毒RNA提取。

4.如权利要求2所述的一种病毒RNA的提取方法，其特征在于：所述口腔拭子样本的取样，将采样拭子样本浸泡于生理盐水中，置于涡旋机上充分震荡1分钟，静置2分钟，然后13000rpm离心1分钟，取上清液，制成病毒样本保存液。