[发明专利]甜菊醇糖苷转运

权利要求书

1.一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主，所述重组宿主过表达介导甜菊醇糖苷转运的多肽，并且所述多肽包含SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列或与其具有至少约50％序列同一性的氨基酸序列。

2.一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主，所述重组宿主已被修饰，优选在其基因组中被修饰，以导致介导甜菊醇糖苷转运的多肽的产生缺陷，并且所述多肽包含SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列或与其具有至少约50％序列同一性的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的重组宿主，所述重组宿主包含编码多肽的重组核酸，所述多肽包含SEQ ID NO:29所示氨基酸序列或与其具有至少约50％序列同一性的氨基酸序列。

4.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含一种或更多种编码以下多肽的重组核苷酸序列：

具有对映-柯巴基焦磷酸合酶活性的多肽；

具有对映-贝壳杉烯合酶活性的多肽；

具有对映-贝壳杉烯氧化酶活性的多肽；以及

具有贝壳杉烯酸13-羟化酶活性的多肽。

5.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含编码具有NADPH-细胞色素p450还原酶活性的多肽的重组核酸序列。

6.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含编码以下项中的一种或更多种的重组核酸序列：

(i)具有UGT74G1活性的多肽；

(ii)具有UGT2活性的多肽；

(iii)具有UGT85C2活性的多肽；和

(iv)具有UGT76G1活性的多肽。

7.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其中所述宿主属于Saccharomyces、Aspergillus、Pichia、Kluyveromyces、Candida、Hansenula、Humicola、Issatchenkia、Trichosporon、Brettanomyces、Pachysolen、Yarrowia、Yamadazyma或Escherichia属中的一种。

8.根据权利要求7所述的重组宿主，其中所述重组宿主是Saccharomyces cerevisiae细胞、Yarrowia lipolytica细胞、Candida krusei细胞、Issatchenkia orientalis细胞或Escherichia coli细胞。

9.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其中所述宿主产生香叶基香叶基二磷酸(GGPP)的能力被上调。

10.根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，其包含编码以下项中的一种或更多种的核酸序列：

具有羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶活性的多肽；或者

具有法尼基-焦磷酸合成酶活性的多肽。

11.一种能够产生甜菊醇糖苷的重组宿主，所述重组宿主过表达介导甜菊醇糖苷转运的异源多肽。

12.一种制备甜菊醇糖苷的方法，所述方法包括在合适的发酵培养基中发酵根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主，以及任选地回收所述甜菊醇糖苷。

13.根据权利要求12所述的制备甜菊醇糖苷的方法，其中所述方法以工业规模进行。

14.一种发酵液，其包含通过根据权利要求12或13所述的方法能够获得的甜菊醇糖苷。

15.通过根据权利要求12或13所述的方法获得的或者从根据权利要求14所述的发酵液获得的甜菊醇糖苷。