[发明专利]用于快速鉴定玉米单倍体的荧光诱导系的标记基因以及荧光诱导系的构建方法有效
申请号: | 202111486232.9 | 申请日: | 2021-12-07 |
公开(公告)号: | CN114196774B | 公开(公告)日: | 2023-09-19 |
发明(设计)人: | 孟德璇;罗海山;董小妹;李丛;陈涵宇;吕香玲;李凤海 | 申请(专利权)人: | 沈阳农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/29;A01H1/02;A01H1/04 |
代理公司: | 北京华清迪源知识产权代理有限公司 11577 | 代理人: | 郑兴旺 |
地址: | 110866 辽宁省沈阳市*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 快速 鉴定 玉米 单倍体 荧光 诱导 标记 基因 以及 构建 方法 | ||
1.一种用于快速鉴定玉米单倍体的荧光诱导系构建的标记基因,其特征在于,其核酸分子为如下(a)基因:
(a)其编码序列是SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的cDNA分子或基因组DNA分子。
2.如权利要求1所述的用于快速鉴定玉米单倍体的荧光诱导系构建的标记基因,其特征在于,
所述标记基因在细胞核、细胞膜和细胞质中均有表达。
3.权利要求1或2所述的标记基因相关生物材料在培育玉米单倍体高诱导率诱导系中的应用,所述生物材料为如下(a1)至(a4)中的任一种:
(a1)含有权利要求1所述核酸分子的表达盒;
(a2)含有所述(a1)所述核酸分子的表达盒;
(a3)含有(a1)所述核酸分子的重组载体、或含有(a2)所述表达盒的重组载体;
(a4)含有(a1)所述核酸分子的重组微生物、或含有(a2)所述表达盒重组微生物、或含有(a3)所述重组载体的微生物。
4.一种快速鉴定玉米单倍体的荧光诱导系的构建方法,其特征在于,所述方法包括:
将权利要求1所述的任一标记基因构建到含有UBIQUITIN启动子及荧光蛋白的过表达载体,通过农杆菌浸胚法转化至玉米受体植株,得到含所述标记基因的阳性玉米植株;
将所述阳性玉米植株与玉米单倍体诱导系CAU5杂交并回交选育,获取含玉米单倍体诱导基因位点ZmPLA1、ZmDMP及所述标记基因的含有荧光标签且具有高诱导率的新型玉米单倍体诱导系。
5.如权利要求4所述的单倍体高诱导率诱导系的构建方法,其特征在于,
所述荧光蛋白包括黄色荧光蛋白、绿色荧光蛋白或红色荧光蛋白,通过荧光显微镜或借助于荧光检测手段可识别所述荧光蛋白。
6.如权利要求4所述的单倍体高诱导率诱导系的构建方法,其特征在于,
如SEQ ID NO:1所示的标记基因的扩增引物序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示;
如SEQ ID NO:2所示的标记基因的扩增引物序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。
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