[发明专利]一种高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合及鉴定方法和应用

权利要求书

1.一种高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合，其特征在于，所述引物组合包括第一引物组和第二引物组，所述第一引物组包括序列号为SEQ ID NO.1的GW5_YN_F、序列号为SEQ ID NO.2的GW5_YN_R1、序列号为SEQ ID NO.3的GW5_YN_R2；所述第二引物组包括序列号为SEQ ID NO.4的GW5_YZ_F、序列号为SEQ ID NO.5的GW5_YZ_R1、序列号为SEQ ID NO.6的GW5_YZ_R2。

2.根据权利要求1所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合，其特征在于，所述引物组合还包括第三引物组，第三引物组包括序列号为SEQ ID NO.4的GW5_YZ_F、序列号为SEQ ID NO.6的GW5_YZ_R2、序列号为SEQ ID NO.7的GW5_YZ_R3。

3.一种采用权利要求1或2所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合的鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、将第一引物组中的GW5_YN_F引物及GW5_YN_R2引物与第二引物组组合形成五引物组合；

步骤二、将提取的DNA采用所述五引物组合进行PCR扩增，若扩增出476bp+124bp条带，则为野生型；若扩增出411bp+124bp条带，则为1212bp缺失变异类型；若扩出573bp条带和一条微弱的124bp条带，则为950bp缺失变异类型。

4.根据权利要求3所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合的鉴定方法，其特征在于，所述步骤一中采用GW5_YZ_R3引物替换第二引物组中的GW5_YZ_R1；所述步骤二中，若仅扩增出292bp条带，则为野生型；若同时扩增出292和411bp的条带，则为1212bp缺失变异类型；若特异扩增出573bp条带，则为950bp缺失变异类型。

5.根据权利要求3或4所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合的鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增是以20μl的PCR扩增体系为基准，每条引物各0.5μl，模板的用量均为2μl。

6.根据权利要求3或4所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合的鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增的过程中退火温度为55-60℃，退火时间为30s。

7.根据权利要求6所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合的鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增的过程中退火温度为55℃。

8.权利要求1或2所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合在水稻品种鉴定试剂盒中的应用。

9.权利要求1或2所述高效鉴定粒重基因GW5不同等位的引物组合在水稻杂交育种鉴定中的应用。