[发明专利]调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白及其制备方法在审

专利信息
申请号: 202111483853.1 申请日: 2021-12-07
公开(公告)号: CN114149983A 公开(公告)日: 2022-03-08
发明(设计)人: 代新仁;孟文静;高新起;李全梓;朱东姿 申请(专利权)人: 中国林业科学研究院
主分类号: C12N9/02 分类号: C12N9/02;C12N15/70;C12Q1/6895
代理公司: 北京八月瓜知识产权代理有限公司 11543 代理人: 袁晓雨
地址: 100091*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 调控 植物 花粉管 柱头 识别 硫氧还蛋白 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白,其特征在于:所述硫氧还蛋白的序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。

2.根据权利要求1所述调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白,其特征在于:所述硫氧还蛋白为含有序列表SEQ ID No.1或SEQ ID No.2的真核重组表达质粒pETrx转化大肠杆菌DH5α获得的重组蛋白。

3.根据权利要求1或2所述调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

①用引物F1和R1进行PCR扩增cDNA,PCR产物纯化后与载体pBS T连接,连接混合液转化大肠杆菌,得质粒pBSTrx;

②将质粒pBSTrx和质粒pET259用限制性内切酶EcoRV酶切,酶切片段用T4 DNA连接酶连接,连接液转化入大肠杆菌,得质粒pETrx;

③将质粒pETrx转化BL21(DE3),所得转化子BL21(DE3)/pETrx纯化所得重组蛋白,制得氨基酸序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的硫氧还蛋白。

4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:以拟南芥cDNA为模板。

5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:制备SEQ ID No.1所示硫氧还蛋白的插入突变体基因为gr1-1,制备SEQ ID No.2所示硫氧还蛋白的插入突变体基因为nrta-1。

6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:gr1-1插入到GR1的第三个内含子序列中,ntra-1插入到NTRA的第1个外显子序列中。

7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于:GR1的基因序列表如SEQ ID No.3所示;NTRA的基因序列表如SEQ ID No.4所示。

8.一种如权利要求1或2所述硫氧还蛋白于调控植物花粉管与柱头识别中的应用。

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