[发明专利]调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白及其制备方法在审
| 申请号: | 202111483853.1 | 申请日: | 2021-12-07 |
| 公开(公告)号: | CN114149983A | 公开(公告)日: | 2022-03-08 |
| 发明(设计)人: | 代新仁;孟文静;高新起;李全梓;朱东姿 | 申请(专利权)人: | 中国林业科学研究院 |
| 主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/70;C12Q1/6895 |
| 代理公司: | 北京八月瓜知识产权代理有限公司 11543 | 代理人: | 袁晓雨 |
| 地址: | 100091*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 调控 植物 花粉管 柱头 识别 硫氧还蛋白 及其 制备 方法 | ||
1.一种调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白,其特征在于:所述硫氧还蛋白的序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白,其特征在于:所述硫氧还蛋白为含有序列表SEQ ID No.1或SEQ ID No.2的真核重组表达质粒pETrx转化大肠杆菌DH5α获得的重组蛋白。
3.根据权利要求1或2所述调控植物花粉管与柱头识别的硫氧还蛋白的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
①用引物F1和R1进行PCR扩增cDNA,PCR产物纯化后与载体pBS T连接,连接混合液转化大肠杆菌,得质粒pBSTrx;
②将质粒pBSTrx和质粒pET259用限制性内切酶EcoRV酶切,酶切片段用T4 DNA连接酶连接,连接液转化入大肠杆菌,得质粒pETrx;
③将质粒pETrx转化BL21(DE3),所得转化子BL21(DE3)/pETrx纯化所得重组蛋白,制得氨基酸序列表如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示的硫氧还蛋白。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:以拟南芥cDNA为模板。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:制备SEQ ID No.1所示硫氧还蛋白的插入突变体基因为gr1-1,制备SEQ ID No.2所示硫氧还蛋白的插入突变体基因为nrta-1。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:gr1-1插入到GR1的第三个内含子序列中,ntra-1插入到NTRA的第1个外显子序列中。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于:GR1的基因序列表如SEQ ID No.3所示;NTRA的基因序列表如SEQ ID No.4所示。
8.一种如权利要求1或2所述硫氧还蛋白于调控植物花粉管与柱头识别中的应用。
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