[发明专利]具有增强的碳水化合物的高强度酸性Α-葡糖苷酶

权利要求书

1.一种源自CHO细胞的rhGAA组合物，该rhGAA组合物包含比通过(阿葡糖苷酶α；CAS 420794-05-0)所例示的常规rhGAA更高量的rhGAA，该更高量的rhGAA包含携带单-甘露糖-6-磷酸(M6P)或双-M6P的N-聚糖。

2.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中该rhGAA包括与通过SEQ ID NO:1所述的氨基酸序列具有至少95％一致性的氨基酸序列。

3.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中30％或更多的rhGAA结合至阳离子非依赖性甘露糖-6-磷酸受体(CIMPR)，或者30％或更多的rhGAA包含携带单-M6P或双-M6P的N-聚糖。

4.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中50％或更多的rhGAA结合至阳离子非依赖性甘露糖-6-磷酸受体(CIMPR)，或者50％或更多的rhGAA包含携带单-M6P或双-M6P的N-聚糖。

5.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中90％至100％的rhGAA结合至阳离子非依赖性甘露糖-6-磷酸受体(CIMPR)，或者90％至100％或更多的rhGAA包含携带单-M6P或双-M6P的N-聚糖。

6.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中携带M6P的N-聚糖的平均含量范围是从0.5至7.0mol/mol rhGAA。

7.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中携带M6P的N-聚糖的平均含量范围是从1.0至4.0mol/mol rhGAA。

8.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中携带M6P的N-聚糖的平均含量范围是从5.0至6.0mol/mol rhGAA。

9.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中平均来说，这些N-聚糖包含大于3mol/mol的M6P和大于4mol/mol的唾液酸。

10.如权利要求1所述的rhGAA组合物，其中平均来说，该rhGAA上的40％至60％的N-聚糖是复合型N-聚糖；其中该rhGAA上的不超过6.5％的N-聚糖是杂合型N-聚糖，并且其中该rhGAA上的不超过15％的高甘露糖型N-聚糖是非磷酸化的，该rhGAA上的至少10％的高甘露糖型N-聚糖是单-M6P磷酸化的，和/或该rhGAA上的至少2％的高甘露糖型N-聚糖是双-M6P磷酸化的。

11.如权利要求1所述的组合物，其中该rhGAA平均携带2.0至8.0个唾液酸残基/mol的rhGAA。

12.如权利要求1所述的组合物，其中该rhGAA由CHO细胞系ATB200-001-X5-14或由其次代培养物产生。

13.如权利要求1所述的组合物，进一步包括一种分子伴侣。

14.一种用于制造如权利要求1所述的组合物的方法，包括培养CHO细胞系并从CHO细胞培养物中回收所述组合物。

15.一种产生如权利要求1所述的组合物的CHO细胞系。

16.产生如权利要求1所述的组合物的CHO细胞系GA-ATB-200或其次代培养物。