[发明专利]一种用于检测核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于检测核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括单链DNA，所述单链DNA的互补链、限制性核酸内切酶BspH Ⅰ，以及缓冲液；

所述单链DNA的序列如SEQ ID NO:1所示；所述单链DNA的5’端被荧光基团修饰，3’端被淬灭基团修饰。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，其特征在于，所述荧光基团包括FAM、TET、JOE、HEX、CY3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、CY5和LC RED705中的至少一种，所述淬灭基团包括BHQ1、BHQ2、BHQ3和DABCYL中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为第一缓冲液、第二缓冲液、第三缓冲液或第四缓冲液；

所述第一缓冲液包括10–50 mM CH₃COOK, 10-100 mM Tris-acetate，10-100 mM(CH₃COO)₂Mg，0.1-10 μg/mL BSA, pH 5-8；

所述第二缓冲液包括50-150 mM NaCl, 10-50 mM KCl，5-20 mM Na₂HPO₄，1-10 mMKH₂PO₄, pH 5-8;

所述第三缓冲液包括5-100 mM HEPES, 50-200mM NaCl，pH 5-8;

所述第四缓冲液包括5-50 mM Tris-HCl, 0.5-5 mM EDTA, pH 5-8。

4.一种用于筛选核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B抑制剂的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1-3任一所述的试剂盒，以及核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B。

5.一种用于筛选核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B抑制剂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1，将待测化合物与核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B在缓冲液中反应；

S2，加入单链DNA，充分混匀后反应；

S3，加入所述单链DNA的互补链和限制性核酸内切酶BspH Ⅰ，充分混匀后反应；

S4，对步骤S3中反应后的产物进行荧光检测；

所述单链DNA的序列如SEQ ID NO:1所示；所述单链DNA的5’端被荧光基团修饰，3’端被淬灭基团修饰。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述荧光基团包括FAM、TET、JOE、HEX、CY3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、CY5和LC RED705中的至少一种，所述淬灭基团包括BHQ1、BHQ2、BHQ3和DABCYL中的至少一种。

7.如权利要求1-3任一所述的试剂盒在制备用于检测核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B的试剂盒或者用于筛选核酸胞嘧啶脱氨酶APOBEC3B抑制剂中的应用。