[发明专利]一种弗洛里多苷合成代谢组合基因及组合酶

权利要求书

1.一种弗洛里多苷合成代谢组合基因，其特征在于：所述的组合基因包括磷酸葡萄糖异构酶PhGPI基因，葡萄糖磷酸变位酶PhPGM基因，UDPG焦磷酸化酶PhUGP基因，UDP-葡萄糖4-异构酶PhGALE基因，海藻糖磷酸合成酶PhTPS基因和/或海藻糖磷酸磷酸化酶PhTPP基因。

2.根据权利要求1所述的组合基因，其特征在于：

所述的磷酸葡萄糖异构酶PhGPI基因序列为SEQ ID No:1和/或SEQ ID No:2所示的核苷酸序列；

所述的葡萄糖磷酸变位酶PhPGM基因序列为SEQ ID No:3、SEQ ID No:4和/或SEQ IDNo:5所示的核苷酸序列；

所述的UDPG焦磷酸化酶PhUGP基因序列为SEQ ID No:6和/或SEQ ID No:7所示的核苷酸序列；

所述的UDP-葡萄糖4-异构酶PhGALE基因序列为SEQ ID No:8所示的核苷酸序列；

所述的海藻糖磷酸合成酶PhTPS基因序列为SEQ ID No:9、SEQ ID No:10和/或SEQ IDNo:11所示的核苷酸序列；

所述的海藻糖磷酸磷酸化酶PhTPP基因序列为SEQ ID No:12和/或SEQ ID No:13所示的核苷酸序列。

3.一种弗洛里多苷合成代谢组合酶，其特征在于：所述的组合酶由权利要求1-2任一项所述的组合基因编码得到；所述的组合酶包括磷酸葡萄糖异构酶PhGPI，葡萄糖磷酸变位酶PhPGM，UDPG焦磷酸化酶PhUGP，UDP-葡萄糖4-异构酶PhGALE，海藻糖磷酸合成酶PhTPS和/或海藻糖磷酸磷酸化酶PhTPP。

4.根据权利要求3所述的组合酶，其特征在于：

所述的磷酸葡萄糖异构酶PhGPI的氨基酸序列为SEQ ID No:14和/或SEQ ID No:15所示的序列；

所述的葡萄糖磷酸变位酶PhPGM的氨基酸序列为SEQ ID No:16、SEQ ID No:17和/或SEQ ID No:18所示的序列；

所述的UDPG焦磷酸化酶PhUGP的氨基酸序列为SEQ ID No:19和/或SEQ ID No:20所示的序列；

所述的UDP-葡萄糖4-异构酶PhGALE的氨基酸序列为SEQ ID No:21所示的序列；

所述的海藻糖磷酸合成酶PhTPS的氨基酸序列为SEQ ID No:22、SEQ ID No:23和/或SEQ ID No:24所示的序列；

所述的海藻糖磷酸磷酸化酶PhTPP的氨基酸序列为SEQ ID No:25和/或SEQ ID No:26所示的序列。

5.一种载体，其特征在于：所述的载体包含权利要求1-2任一项所述的组合基因。

6.一种宿主细胞，其特征在于：所述的宿主细胞包含权利要求1-2任一项所述的组合基因或权利要求5所述的载体。

7.一种基因工程细胞，其特征在于：所述的基因工程细胞包含权利要求1-2任一项所述的组合基因或权利要求5所述的载体，或生产权利要求3-4任一项所述的组合酶。

8.权利要求1-2任一项所述的组合基因、权利要求3-4任一项所述的组合酶、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的宿主细胞或权利要求7所述的基因工程细胞在弗洛里多苷合成代谢中的应用。

9.权利要求1-2任一项所述的组合基因、权利要求3-4任一项所述的组合酶、权利要求5所述的载体、权利要求6所述的宿主细胞或权利要求7所述的基因工程细胞在红藻和植物育种中的应用。

10.一种弗洛里多苷合成代谢的方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：果糖-6-磷酸Fru-6-P经磷酸葡萄糖异构酶PhPGI转化为葡萄糖-6-磷酸Glu-6-P，再经葡萄糖磷酸变位酶PhPGM转化为葡萄糖-1-磷酸Glu-1-P，在UDPG焦磷酸化酶PhUGP的催化下，Glu-1-P与UTP反应生成UDP-葡萄糖UDP-Glu，UDP-葡萄糖在UDP-葡萄糖4-异构酶PhGALE的催化下被异构化为UDP-半乳糖UDP-Gal，然后UDP-半乳糖和甘油-3-磷酸Gly-3-P在海藻糖磷酸合成酶PhTPS和海藻糖磷酸磷酸化酶PhTPP催化下合成弗洛里多苷。