[发明专利]一种基于单域抗体的BCMA嵌合抗原受体及其应用

说明书

本发明提供一种基于单域抗体的BCMA嵌合抗原受体，所述单域抗体的重链互补决定区包括CDR1、CDR2、CDR3；所述的CDR1为SEQ ID NO.1或与SEQ ID NO.1有80％以上同一性的序列，CDR2为SEQ ID NO.2或与SEQ ID NO.2有80％以上同一性的序列，CDR3为SEQ ID NO.3或与SEQ ID NO.3有80％以上同一性的序列。本发明提供的BCMA嵌合抗原受体由BCMA单域抗体基因片段和2代CAR结构基因序列串联组成，与靶细胞结合力更强、杀伤效果更好、体内持续时间更久。

技术领域

本发明属于免疫细胞治疗领域，具体涉及一种基于单域抗体的BCMA嵌合抗原受体及其应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种浆细胞肿瘤性疾病，主要特征是单克隆浆细胞的恶性增殖、血液或尿液中出现单克隆免疫球蛋白，以及相关的终末器官损伤包括高钙血症、肾功损害、贫血和溶骨性破坏。目前认为所有MM患者均有未明意义单克隆丙种球蛋白病(monoclonal gammopathy of undetermined significance，MGUS)阶段，也称骨髓瘤前期状态。MGUS进展到下一阶段为骨髓瘤，进展概率大约1％/年。骨髓瘤分为2个阶段：冒烟型骨髓瘤(smouldering multiple myeloma，SMM)和活动性骨髓瘤。SMM是介于MGUS和活动性骨髓瘤的中间阶段，也称为骨髓瘤早期。SMM患者不需要治疗，而活动性骨髓瘤患者则需要进行治疗。

MM在肿瘤性疾病中占比约1％，在血液系统恶性肿瘤中占比约13-18％。MM的病因至今尚未明确，可能与病毒感染、电离辐射、接触某些化学物质和遗传等相关。MM的生存期很短，如果不进行任何治疗，进展期患者的中位生存期为6个月。近年来，随着人们对疾病关注意识的提高和蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、自体干细胞移植、达雷妥尤单抗(CD38靶点)和埃罗妥珠单抗(SLAMF7靶点)等应用，缓解率及生存期明显改善，MM患者5年以上的生存率已经达到了49％。但多数病人最终会出现耐药或复发、死亡，所以到目前MM仍被认为是一种不可治愈的疾病。

天然免疫系统中，MM患者NK细胞的细胞毒性和免疫调节功能都受到削弱。MM患者中的抗原提呈细胞树突细胞吞噬细菌和抗原提呈能力下降，不能被肿瘤抗原有效刺激并上调T细胞活化的共刺激信号分子。获得性免疫系统中，MM患者的T细胞分泌分化紊乱和B细胞的功能被削弱，Treg/Th17失衡促进了炎症的持续发生和肿瘤的生长。此外，肿瘤的异质性和骨髓微环境对疾病进展的影响也使得MM难以治愈，因此，开发新型治疗多发性骨髓瘤的方法迫在眉睫。

嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor，CAR)是一种由抗原识别域、一个胞外铰链区(Hinge area)、一个跨膜区(Transmembrane region)、一至二个共刺激域(如CD28、4-1BB等)以及免疫受体酪氨酸活化基序(Immunoreceptor tyrosine-basedactivation motif，ITAM，如来自于CD3ζ链等的片段)构成的人工分子；其中抗原识别域通常来自于单克隆抗体抗原结合区域来源的单链可变片段(single-chain variablefragment，scFv)。

T淋巴细胞可以通过基因工程的手段人为表达CAR，成为嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)，CAR-T通过scFv以抗原-抗体结合的方式来识别特定的细胞表面抗原，继而通过CAR下游的共刺激域以及免疫受体酪氨酸活化基序使CAR-T细胞活化、释放颗粒素、穿孔酶、IFN-γ等，从而特异性地靶向、杀伤表达该抗原的肿瘤细胞。