[发明专利]抗hNKG2D抗体及其应用

说明书

本发明涉及抗体领域，特别涉及抗hNKG2D抗体及其应用。本发明提供了人NKG2D(hNKG2D)抗体及其用途。本发明还提供了抗hNKG2D抗体的鼠源和人鼠嵌合抗体形式。这些抗体对hNKG2D蛋白具有高亲和性，可用于预防或治疗诸如癌症、炎症或自身免疫性疾病。

技术领域

本发明涉及抗体领域，特别涉及抗hNKG2D抗体及其应用。

背景技术

自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与肿瘤、病毒感染和免疫调节有关，而且参与机体超敏反应和自身免疫性疾病的发生发展过程。NK细胞与细胞毒性T细胞功能类似，对病毒感染的细胞、肿瘤细胞有着极快的响应速率。不同之处在于不需要肿瘤特异性抗原递呈，因此NK细胞具有更广谱的抗癌功效。

NK细胞杀伤靶细胞主要通过以下三种机制：1.释放穿孔素/颗粒酶或死亡受体介导杀死肿瘤细胞；2.分泌细胞因子和趋化因子调节免疫系统，协调T细胞杀伤肿瘤细胞；3.NK细胞表面的CD16分子结合抗体的Fc段，介导抗体依赖细胞介导的细胞毒性(Antibody-dependent cellular cytotoxicity,ADCC)作用，识别并杀伤被抗体结合的肿瘤细胞。

NK细胞的活性受细胞表面的激活型和抑制型受体协调调节，抑制型受体有杀伤细胞免疫球蛋白类似受体、c型凝集素受体(NKG2A/CD94)、白细胞免疫球蛋白类似受体和免疫检查点受体(PD-1、TIM-3、LAG-3、TIGIT)等，识别并结合主要组织相容性复合体(majorhistocompatibility complex，MHC)分子。当肿瘤细胞MHC-1分子表达下调后，造成肿瘤细胞免疫逃逸的同时，NK细胞的抑制性受体通路活性下降，负反馈下调，NK细胞活化，进而杀伤那些不表达MHC-I的肿瘤细胞。

NK细胞表面激活型的受体包括：自然细胞毒性引发受体、SLAM家族受体、c型凝集素(NKG2D)、CD16(FcγRIII)。NKG2D分子由Klrk1(killer cell lectin-like receptorsubfamily member 1)基因编码，在NK细胞、NKT细胞、部分CD8+和CD4+T细胞膜表面均有表达。因其胞内区比较短，需要伴侣分子DAP10协同信号传递，当NKG2D与配体结合后，下游的PI3K(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)和/或GRB2(growth factor receptor-boundprotein 2,GRB2)信号通路活化，导致NK细胞活化、增殖、分泌细胞因子，活化免疫系统。NKG2D配体有MHC I类相关分子家族(MICA/B)和人巨细胞病毒蛋白UL16的结合蛋白(ULBP1-6)家族等，上述配体在病毒/细菌感染、恶性转化的细胞上表达，研究表明在炎症部位或自身免疫患者的组织中也有上述配体异常表达，如类风湿性关节炎、糖尿病、乳糜泻、克罗恩病、动脉粥样硬化、脱发和哮喘(Guerra et al.Clin Immunol 2013；149:432-9)。

肿瘤细胞产生的NKG2D的可溶性配体，可以使NKG2D分子内化，降低NK细胞介导的肿瘤细胞裂解，导致肿瘤免疫逃逸。因此NKG2D分子成为肿瘤免疫治疗新靶标之一。目前针对NKG2D的药物研发尚处于临床研究阶段，有研究发现抗NKG2D抗体可以增强NK细胞的细胞毒性和细胞因子分泌；另有文章报道，针对NKG2D配体MICA/MICB的抗体，可以阻断配体从细胞膜脱落，稳定膜型配体的数量，从而达到增强NK细胞的活性，增强肿瘤杀伤活性。上述研究表明，靶向NKG2D的抗体，可以发挥调控NK细胞活性的作用，提示NKG2D可以成为治疗肿瘤、炎症或自身免疫疾病的靶标。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了抗hNKG2D抗体及其应用。该抗体对hNKG2D蛋白具有高亲和性，可用于预防或治疗诸如癌症、炎症或自身免疫性疾病。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：