[发明专利]一种固定化双酶-无机杂化纳米花及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 202111452915.2 | 申请日： | 2021-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN114107278A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 彭友兵 | 申请（专利权）人： | 河北凯恩利生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/18 | 分类号： | C12N11/18;C12N11/14;C12N9/86;C12N9/80;C12P13/04 |
| 代理公司： | 北京博尔赫知识产权代理事务所(普通合伙) 16045 | 代理人： | 王灿 |
| 地址： | 052560 河北省石家庄*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 固定 化双酶 无机 纳米 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将酶液与磷酸氢二钾混合，然后调节pH至6.0～6.1，得到酶的磷酸盐溶液；
(2)将步骤(1)得到的酶的磷酸盐溶液静置，离心得沉淀，并将沉淀洗涤。
2.根据权利要求1所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述磷酸氢二钾与酶液的质量体积比为1～3g∶80～120ml。
3.根据权利要求1所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述酶液中含有D-对羟基苯海因酶和N-氨甲酰水解酶；步骤(1)所述调节pH所用试剂为质量浓度为20～30％的氯化锰溶液。
4.根据权利要求3所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，所述D-对羟基苯海因酶和N-氨甲酰水解酶的酶活独立为4～8MU/ml。
5.根据权利要求1所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述静置时间为10～14h。
6.根据权利要求1所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述离心转速为4000～5000转/分钟，时间为4～6min。
7.根据权利要求1所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述洗涤所用试剂为质量浓度为0.05～0.15％的氯化锰溶液。
8.根据权利要求7所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述沉淀与氯化锰溶液的质量体积比为2～4g∶8～16ml。
9.权利要求1～8任一项所述的一种固定化双酶-无机杂化纳米花的制备方法制备得到的固定化双酶-无机杂化纳米花。
10.权利要求9所述的固定化双酶-无机杂化纳米花在制备D-(-)-对羟基苯甘氨酸中的应用。
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