[发明专利]一种用于诊断结直肠癌的血浆miRNA标志物及其应用

说明书

本发明涉及一种定量检测血浆中miRNA表达水平的试剂及其在制备结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用，所述miRNA选自miRNA‑20a、miRNA‑29a、miRNA‑29b、miRNA‑92、miRNA‑125b和miRNA‑145中的一种或多种组合。本发明获得了能稳定应用于结直肠癌诊断的血浆miRNAs生物标志物的组合，该组合生物标志物在结直肠癌早期诊断中具有显著医学的价值。

技术领域

本发明属于生物学领域，具体涉及一种用于诊断结直肠癌的血浆miRNA标志物。

背景技术

结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤，其已成为威胁我国居民健康的重大疾病之一，是亟待解决的重大公共卫生学问题。结直肠癌的早期发现、早期诊断、早期治疗是降低死亡率和改善预后的关键。早期结直肠癌五年生存率超过70％以上，而晚期则在20％左右。欧美等西方国家近年来结直肠癌发病率和死亡率均呈现出下降趋势，表明结直肠癌筛查是降低结直肠癌发病率和死亡率的有效手段。

但通过国内外现有的筛查经验也发现了一些待完善的方面：(1)FIT是常用的非侵入式的结直肠癌筛查方法，对于结直肠癌的灵敏度和特异度较高，但是检出进展期腺瘤的效果较差，灵敏度仅为23.8％，还容易受到抗血小板药物使用带来的假阳性影响；(2) 目前肠镜检查是发现结直肠癌的金标准，但由于其侵入性较强，给受检者带来较大的生理及心理痛苦，筛查人群中肠镜的顺应性极低。根据国内已开展的结直肠癌筛查项目，初筛阳性的人群自愿接受肠镜检查的比例仅为14％-40％。因此，寻找更加有效、简单易行的结直肠癌及癌前病变早期发现检测手段是目前提高结直肠癌筛查效果的当务之急。

微小RNAs(MicroRNAs，miRNAs)是一类长度约19-25个核苷酸的非编码RNA，成熟的miRNA与靶基因3’UTR发生配对，可以导致靶基因miRNA的降解或者翻译抑制，在转录后水平发挥重要的表达调控作用，并参与肿瘤细胞的增殖、凋亡等过程，从而在肿瘤的发生、发展、转移等方面扮演重要角色。miRNAs对许多结直肠癌相关重要信号通路具有调控作用，如miR-21异常表达会引起Wnt/β-catenin通路和RAS-MAPK通路过度激活，会引起TGF-β信号响应缺失，从而在结直肠癌的发生发展中发挥重要作用。同时也有人群研究发现，血浆miRNA可以较好地区分结直肠癌、进展期腺瘤和健康对照。前期研究显示，单个miRNA标志物对疾病的预测能力仍然较弱，目前对结直肠癌仍缺乏具有较高预测能力的有效诊断方法。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明包括以下几个方面：

本发明第一方面提供一种定量检测血浆中miRNA表达水平的试剂在制备结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用，所述miRNA选自miRNA-20a、miRNA-29a、miRNA-29b、 miRNA-92、miRNA-125b和miRNA-145中的一种或多种组合。

优选的，所述miRNA选自miRNA-20a、miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-92、 miRNA-125b和miRNA-145中的三种以上的组合。

更优选的，所述miRNA选自(1)miRNA-20a、miRNA-29a和miRNA-29b的组合，或者(2)miRNA-29a、miRNA-29b和miRNA-92的组合，或者(3)miRNA-29b、miRNA-92 和miRNA-125b的组合。

优选的，所述miRNA选自miRNA-20a、miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-92、 miRNA-125b和miRNA-145中的四种以上的组合。