[发明专利]快速超灵敏检测土霉素的荧光探针及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种快速超灵敏检测土霉素的荧光探针及其制备方法与应用，涉及抗生素初检技术领域，本发明利用OTC和Ca²⁺结合的特殊光学性质，制备了一种双发射荧光探针，以红色发光CdTe QDs作为内参，CdTe QDs表面的Ca²⁺螯合作为受体和特异性识别单元，添加OTC后，形成的Ca/CdTe‑OTC配合物的荧光发射明显增强，而CdTe QDs的荧光发射保持不变，因此可以在0.1s内进行OTC的视觉检测，检测限为1.31nM，远低于世界卫生组织规定的动物源性食品中最大残留限量0.1mg/kg，从而适用于水体以及肉制品中OTC的检测。

技术领域：

本发明涉及抗生素初检技术领域，具体涉及一种快速超灵敏检测土霉素的荧光探针及其制备方法与应用。

背景技术：

众所周知，快速反应和超灵敏度对探针至关重要，特别是在食品安全、临床诊断和对爆炸性或其他违禁物品的公开筛查中。在车站、机场和公共场所等需要长时间排队等待检查结果的情况下，响应速度快的探针可以在公共监测领域得到更广泛的应用。

与传统的实验室技术相比，便携式智能检测设备可以满足现场检测各种残留物的需求，具有令人满意的准确性和灵敏度。同时成本更低，设计小型化的核酸适体、单克隆抗体、荧光纳米材料等敏感材料的引入是分析器件发展的重要途径。基于纸张的探针作为一种不需要额外设备的简单检测设备，已被应用于许多领域，并随着微流控技术和比色法的兴起而扩大。与此同时，柔性探针因其成本低、制造工艺简单、性能优异而备受关注，应用于构建智能可穿戴医疗诊断设备。

在过去的几十年里，抗生素滥用引起的食品安全问题引起了广泛关注。土霉素(OTC)是一种广谱四环素类抗生素，因其良好的抗菌、杀菌效果已广泛应用于人类治疗、水产养殖和畜牧业。然而，不当使用OTC药物会导致动物性食品、地下水和废水中的残留物含量过高，通过食物链造成抗药性和过敏反应等健康威胁。土霉素残留常用的分析方法主要有紫外分光光度法、荧光光度法、液相色谱-质谱法、液相色谱法、化学发光法、毛细管电泳法、电化学探针法等。因此，一种快速、可靠、低成本、灵敏的原位检测方法在环境监测和食品安全中具有重要意义。到目前为止，已经开发了一些简便的探针用于OTC的检测。采用基于Si NPs的荧光探针可对OTC进行响应，Liu等利用分子印迹技术构建了一种荧光探针，用于灵敏和选择性检测四环素。然而这些探针很难满足便携式和用户友好的现场检测标准，因此开发一种灵敏、快速的视觉定量检测方法是至关重要的。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题在于提供一种荧光探针，可以在不进行复杂前处理的情况下对土霉素进行灵敏、准确的检测。

本发明所要解决的技术问题采用以下的技术方案来实现：

本发明的一个目的是提供一种快速超灵敏检测土霉素的荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

(1)CdTe QDs的合成：将Cd(CH₃CO₂)₂·2H₂O和3-巯基丙酸溶于去离子水中，用NaOH水溶液将pH调至微碱性，超声处理，再加入K₂TeO₃和去离子水搅拌，然后加入NaBH₄，超声处理，将所得混合物加热至沸腾后回流反应，反应结束后，将获得的CdTe QDs烘干，收集干粉，保存在冰箱中备用；

(2)Ca/CdTe探针的合成：将蒸馏水和上述步骤(1)制备的CdTe QDs粉末搅拌均匀，然后加入CaCl₂·2H₂O，室温搅拌，超声处理，反应结束后，将获得的Ca/CdTe烘干，收集干粉，保存在冰箱中备用。

所述微碱性的pH＝8-12。

所述Cd(CH₃CO₂)₂·2H₂O与3-巯基丙酸的摩尔比为4:1-8:1。