[发明专利]一种可表达高活性乳糖酶的黄瓜类芽孢杆菌菌株

说明书

本发明属于微生物领域，公开了该菌株为黄瓜类芽孢杆菌（Paenibacillus cucumis.），菌株编号BHNB003001，保藏日期为2021年10月11日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏编号为CCTCC NO：M 20211256。所筛选获得的黄瓜类芽孢杆菌菌株CCTCC NO：M 20211256所产的乳糖酶对酶活性适应温度和pH范围较广，在工业生产中有较大的优势。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体讲是一种可表达高活性乳糖酶的黄瓜类芽孢杆菌菌株。

背景技术

黄瓜类芽孢杆菌（Paenibacillus cucumis.） 属于芽孢杆菌科、类芽孢杆菌属，是一类能产生抗力内生孢子的革兰氏阳性菌，细胞呈杆状且外层覆盖大量的吡啶二羧酸钙。其皮层位于核心和芽孢壳之间，含丰富的肽聚糖；核心是一种高度浓缩的、惰性的染色体；最外层的外壁为一层肽聚糖壁，且一层或多层的成分为蛋白质的芽孢衣。由于芽孢具有厚而含水量低的多层结构，所以折光性强，对染料不易着色，稳定性好，耐氧化、耐挤压、耐高温，能长期耐受 60 ℃高温，在温度 120 ℃下能存活 20 min，且耐酸碱，在胃酸环境中能保持活性，这可能与芽孢独具的高含量吡啶二羧酸有关。同时还具有广谱杆菌活性，能产生细菌素，抑制病原菌。

而其所产的乳糖酶在工业上主要用于乳制品工业。利用其水解作用分解乳制品中的乳糖，生产低乳糖或无乳糖乳制品，供乳糖不耐受的广大人群食用。葡萄糖是人体各部分代谢的能量来源，半乳糖则是人大脑和黏膜组织代谢时必需的结构糖，是婴幼儿脑发育的必要组织，与婴儿大脑的迅速成长有密切联系。再者，乳糖酶还可在人体内通过转糖苷作用生成低聚糖，这些低聚糖是一种低分子量，不粘稠的水溶性膳食纤维，它在肠道内作为增殖因子仅被双歧杆菌利用，却不会被腐败细菌利用，如此可大大减少肠道有害毒素的产生，对预防便秘和腹泻有很重要的作用。

乳糖酶在乳制品工业应用研究具有广阔的前景，但目前市场上销售的乳糖酶存在温度适应范围窄、热稳定性差等问题。

因此，筛选出一种能表达出温度适应范围广、热稳定性好、拥有高活性的乳糖酶的菌株对工业化生产具有重大意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上现有技术的缺点：提供一种能表达出温度适应范围广、热稳定性好、高活性的乳糖酶的菌株。

本发明的技术解决方案如下：一种可表达高活性乳糖酶的黄瓜类芽孢杆菌菌株，该菌株为黄瓜类芽孢杆菌（Paenibacillus cucumis.），菌株编号BHNB003001，保藏日期为2021年10月11日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，保藏编号为CCTCC NO：M 20211256。

其表达乳糖酶酶活力适应温度范围为20-60℃。

其表达乳糖酶最适的酶反应温度为35℃。

其表达乳糖酶酶活力适应pH值范围为4-8。

其表达乳糖酶在pH 6.5时的酶活力最高。

其核苷酸测序序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明的有益效果是：本发明的黄瓜类芽孢杆菌菌株CCTCC NO：M 20211256从海水中筛选获得。所筛选获得的黄瓜类芽孢杆菌菌株CCTCC NO：M 20211256产出的乳糖酶的酶活性适应温度和pH范围较广，在工业生产中有较大的优势。

本发明黄瓜类芽孢杆菌（Paenibacillus cucumis.）的保藏日期为2021年10月11日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCC NO：M 20211256。