[发明专利]一种含有胞外多糖的提取物、胞外多糖及组合物

权利要求书

1.一种含有胞外多糖的提取物，其通过如下步骤提取得到：

1)将苏云金芽胞杆菌的发酵液pH值调至8至9，然后进行第一离心，收集第一离心后的第一上清液；

2)在所述第一上清液中加入三氯乙酸或三氯乙酸的水溶液，从而用三氯乙酸处理所述第一上清液，得到第一处理液，然后进行第二离心，收集第二离心后的第二上清液；

3)将所述第二上清液的pH值调至6至7后向所述第二上清液中加入乙醇，得到第二处理液，对所述第二处理液进行沉淀，然后进行第三离心，收集第三离心后的沉淀物，所述沉淀物即为湿的含有胞外多糖的提取物；优选地，将所述沉淀物进行冷冻干燥，从而得到干的含有胞外多糖的提取物。

2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述苏云金芽胞杆菌为4D19菌株。

3.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，在步骤2)中，所述三氯乙酸与第一上清液中的质量/体积含量为0.4％至0.5％；和/或

在步骤3)中，向所述第二上清液中加入的乙醇的体积为所述第二上清液的体积的3至3.5倍。

4.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，在步骤2)中，所述第一处理液于25至35℃下放置1.5至3个小时；和/或

在步骤3)中，所述第二处理液于2至8℃放置12至20小时。

5.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述第一离心、所述第二离心、所述第三离心的离心速度独立地为6000至8000r/min，离心温度独立地为3至10℃，离心时间独立地为30至40min。

6.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，培养所述苏云金芽胞杆菌的培养基为LB培养基、以葡萄糖为底物的产糖培养基和以蔗糖为底物的产糖培养基中的一种。

7.一种胞外多糖，其由权利要求1至6中任意一项所述的提取物经残留蛋白去除、脱盐、阴离子交换层析和凝胶过滤层析纯化得到；

优选地，所述胞外多糖为EPS-1和/或EPS-2，其中，

以所述EPS-1的总质量计作100％，所述EPS-1中的总糖含量为93.95％，糖醛酸的含量为3.73％，还原糖的含量为1.8％；

所述EPS-1的Mw＝155.6kDa，Mn＝154.0kDa，Mz＝157.2kDa，所述EPS-1的分散度为1.01；

以所述EPS-2的总质量计作100％，所述EPS-2中的总糖含量为96.53％，糖醛酸的含量为0.94％，还原糖的含量为1.48％；

所述EPS-2的Mw＝58.0kDa，Mn＝56.8kDa，Mz＝59.3kDa，所述EPS-2的分散度为1.02；

所述EPS-2由甘露糖、氨基葡萄糖、氨基半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和甘露糖醛酸组成，其中，以所述EPS-2的总质量计作100％，所述EPS-2中的甘露糖的含量为44.2％，氨基葡萄糖的含量为35.5％，氨基半乳糖的含量为8.0％，葡萄糖的含量为5.5％，阿拉伯糖的含量为5.1％。

8.一种组合物，其包括如权利要求1至6中任意一项所述的提取物或如权利要求7中所述的胞外多糖，以及来源于苏云金芽胞杆菌的杀虫晶体蛋白和/或源于苏云金芽胞杆菌的营养期杀虫蛋白；

优选地，所述组合物还包括农药学上可接受的助剂；

优选地，所述组合物形成的剂型为悬浮剂、可湿性粉剂和颗粒剂中的一种。