[发明专利]一种油梨的组织快繁方法

权利要求书

1.一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、外植体消毒：选择含芽油梨茎段，进行消毒，得到消毒完的外植体材料；

S2、诱导萌发：将外植体材料重新切除外植体两端，然后按生长极性接种到MS培养基中培养，接好外植体的MS培养基先置于黑暗中培养2天，随后转入光照培养；

S3、芽条育壮培养：外植体材料经萌发培养后，当新萌发芽茎长到1cm以上时，将外植体材料接种到育壮培养基中进行增殖培养；培养到萌发的芽条，育壮至长度3cm以上，茎粗壮，长势良好，顶部叶片1-2张开；

S4、芽条继代增值：将经过育壮培养的芽条，从靠近老的茎段基部切割下来，然后移植继代增值培养基培养，当恢复生长时，切除顶部芽，然后继续在移植继代增值培养基培养，按照以上继代增殖流程培养，当培养到所需的增殖系数或所需要的植株数量，就可以进行下一步的诱导生根培养，芽条的剩余部分可以一直增殖；

S5、再生植株的生根培养：对于经过继代增值培养的芽条，选取叶片嫩绿、生长旺盛且叶片4-6片叶以上、茎干健壮的茎芽，插入生根培养基，诱导生根培养；

S6、炼苗移栽：待生根培养后的培苗的苗高长3厘米以上，形成不定根3根以上，且根长超过5厘米时，放在室温内，闭瓶培育3天以上后；进行锻炼，待新叶展开4-5叶后即可带土移栽至大田。

2.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，MS基础培养基中包括：硝酸钾KNO₃：1900mg/L；硝酸铵NH₄NO₃：1650mg/L；磷酸二氢钾KH₂PO₄：170mg/L；硫酸镁MgSO₄·7H₂O：370mg/L；氯化钙CaCl₂·2H₂O：440mg/L；碘化钾KI：0.83mg/L；硼酸H₃BO₃：6.2mg/L；硫酸锰MnSO₄·4H₂O：22.3mg/L；硫酸锌ZnSO₄·7H₂O：8.6mg/L；钼酸钠Na₂MoO₄·2H₂O：0.25mg/L；硫酸铜CuSO₄·5H₂O：0.025mg/L；氯化钴CoCl₂·6H₂O：0.025mg/L；乙二胺四乙酸二钠Na₂-EDTA：37.25mg/L；硫酸亚铁FeSO₄·7H2O：27.85mg/L；肌醇：100mg/L；甘氨酸：2mg/L；盐酸硫胺素VB1：0.1mg/L；盐酸吡哆醇VB₆：0.5mg/L和烟酸VB₅：0.5mg/L。

3.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，所述含芽油梨茎段为含有多个腋芽或顶芽的油梨茎段，含芽油梨茎段包括嫩茎段和老茎段。

4.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，所述S1中，消毒的具体步骤为：先通过洗洁精溶液浸泡2分钟，流动自来水冲洗10分钟，75vol％乙醇浸泡15s，无菌水冲洗4-5次，0.1wt％氯化汞和0.1wt％吐温的混合溶液浸泡15min，无菌水冲洗4-5次，75vol％乙醇浸泡10s，无菌水冲洗4-5次。

5.根据权利要求1所述的一种油梨的组织快繁方法，其特征在于，所述S2中，MS培养基中包括：MS基础培养基、6-BA 0.5-4mg/L、8wt％琼脂粉和蔗糖30g/L，MS培养基的pH值为5.7，培养条件为：培养温度为21-25℃，光照时间为14小时/天，光照强度30-40微摩尔/米²·秒。