[发明专利]一种动物眼球病理切片制作方法

说明书

本发明涉及一种动物眼球病理切片制作方法，包括以下步骤：摘取动物眼球并保留3‑8mm视神经，使用生理盐水冲洗除去血污；将动物眼球置于生理盐水中，然后用微波炉中火加热处理4‑12min；将动物眼球放入冰醋酸、氯仿和甲醇配制的固定液中，固定60‑90h；将动物眼球用正丁醇脱水2‑4次，每次0.5‑3小时；然后，将动物眼球用二甲苯透明2‑4次，每次10‑20min，二甲苯透明处理总时长30‑50min；第一次石蜡处理1‑2h，第二次石蜡处理1‑2h，处理后进行石蜡包埋；按照设定厚度进行切片。本发明方法制作动物眼球病理切片的时候，结合动物眼球结构特点，采用微波处理眼球，使得眼球结构蛋白变性实现眼球结构强度预增强，对于动物眼球细微结构的精确研究和教学具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种动物标本制作方法，特别是一种动物眼球病理切片制作方法，属于生命科学技术领域。

背景技术

动物标本是指经过人工加工制作，用于展示动物特定组织的微观形貌的特殊科研或教学用具。现有技术对于普通的动物病理切片制作经验较为丰富，其整体制作过程也形成了一些较为规范化的操作流程，但是对于某些特殊的动物组织或器官，由于其他形态结构的特点，导致一般标本制备方法难以满足相应组织或器官的制作要求，无法获得令人满意的动物切片标本样品。

在对组织或器官进行脱水处理的时候，由于病理切片本身复杂的结构形态及成分组成，组织切片处理过程中非常容易出现切片变形，导致病理切片结构形貌变形，无法满足原始的研究或教学目的。现有技术主要通过将病理组织包埋在石蜡块中，利用石蜡对于组织固定支撑，以确保制备的病理组织切片结构完整满足研究或教学的需求。

眼球是一个结构复杂特殊器官，其结构精细，内部存在空腔结构，内部各种组织部分的软硬度相差甚多，巩膜结构致密，视网膜柔软极易脱落，晶体坚硬，玻璃体为胶状组织易丢失。由于眼球独特的结构性质，在制作病理切片的时候，石蜡块包埋是比较困难的，石蜡不容易进入到眼球内部，也就无法形成有效的支撑作用，限制最终的切片工艺实施，容易出现固定不充分、组织变形及丢失的问题。

中国专利CN110823663A公开一种动物眼球病理切片制作方法，该专利通过将眼球摘取以后，经过剪断附属肌肉，分离出眼球；然后将眼球放入4℃固定液中进行固定48小时；再经过乙醇脱水处理，实现脱水透明；进而将眼球用浸蜡包埋处理，利用石蜡分两次进行包埋；最后按照一定厚度进行切片处理。尽管该专利在一定程度上改进了眼球石蜡切片的制作方法，但仍然存在周期长、材料及步骤要求繁琐等缺点。且该专利方法仅注重了视网膜结构的完整保留，并未展示眼球整体结构的完整性，如晶状体、玻璃体等眼球组件的完整性。

另外，对于病理切片通常期望制备得到具有连续特性的病理切片，能够更好地观察组织或器官病变过程，为科研及临床治疗提供理论指导。常规病理切片工艺方法能够获得的切片较厚，且切片间隔距离较远，对于局部细节观察精度有限，无法对眼球病变发生过程精确研究，不利于临床病理诊断或学生对于眼球病理组织立体结构知识积累。

因此，非常有必要研究标准且高效的眼球病理切片制作方法，又快又好的制备切片标本，得到连续且完整的眼球结构病理切片，为眼科相关科研及临床治疗提供理论指导。

发明内容

本发明的目的在于：针对现有技术存在眼球组织易变形、丢失，病理切片较厚，无法形成连续的高精度切片问题，提供一种动物眼球病理切片的制作方法。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种动物眼球病理切片制作方法，包括以下步骤：

S1、眼球摘取：摘取动物眼球并保留3-8mm视神经，使用生理盐水冲洗除去血污；

S2、微波处理：将动物眼球置于生理盐水中，然后用微波炉中火加热处理4-12min；