[发明专利]一种识别黄绿卷毛菇原产地的DNA条形码、引物组及应用

说明书

本发明公开了一种识别黄绿卷毛菇原产地的DNA条形码、引物组及应用，属于食用菌种质资源筛选技术领域。本发明与传统育种方法及其他现有DNA条形码技术相比较，它具有省时、省力、省钱、准确、高效的优点，在优质黄绿卷毛菇原产地鉴别和遗传育种上发挥积极作用，同时也为种质资源的鉴定及保护提供了一种有效方法。

技术领域

本发明涉及食用菌种质资源筛选技术领域，更具体的说是涉及一种筛选黄绿卷毛菇原产地的DNA条形码、引物组及应用。

背景技术

黄绿卷毛菇，色泽呈金黄色，又称为黄蘑菇、金蘑菇，是一种风味独特的优质食用菌，当前不能人工栽培。野生黄绿卷毛菇主要分布于青藏高原，主产区为西藏自治区当雄县、青海省祁连县以及四川省石渠县等，也以这三个主产区的品质最佳。黄绿卷毛菇不同产地具有不同营养价值，不同风味，不同生物学活性，不同市场价格。以往对黄绿卷毛菇的选育主要利用形态学方法结合有益成分含量指标进行测定，但是受到特殊的青藏高气候原环境的影响，不同地区所产的黄绿卷毛菇常常出现同名异物和同物异名的现象，因此形态学鉴别法难以有效区分。此外，由于其所分布的主产区海拔较高，样本采集也十分困难。

DNA条形码分子鉴定技术是基于DNA条形码(基因组中保守且稳定遗传DNA序列)来进行物种和优良品质识别鉴定的分子生物学技术。它是传统育种方法的有效补充和拓展，能够在样品形态不完整或缺乏形态结构(加工制品如粉末等)时对样品进行精准和有效地鉴定。为了实现黄绿卷毛菇的有效开发利用，利用DNA条形码分子鉴定技术辅助筛选黄绿卷毛菇菌株不同产地显得尤为重要和迫切。现有的DNA条形码技术中，ITS(核糖体RNA内转录间隔区)和线粒体体中的非编码区或保守基因序列主要用于物种物鉴定；限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)操作十分繁复，结果的可靠性和可重复性较差，随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA，RAPD)易受干扰，对操作者技术水平要求较高，在辅助育种工作中难以推广；单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism，SNP)对设备要求高，成本也高。

因此针对传统育种方法选育黄绿卷毛菇菌株不够准确且费时费力的缺点，有必要提供一种DNA条形码用于准确、快捷鉴别黄绿卷毛菇产地是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种识别黄绿卷毛菇原产地的DNA条形码、引物组，可以快速、准确鉴别黄绿卷毛菇的原产地，为选育优质黄绿卷毛菇的有利辅助手段。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种识别黄绿卷毛菇原产地的DNA条形码，所述DNA条形码的核苷酸序列包括：

如SEQ ID NO：4，

和/或SEQ ID NO：5，

和/或SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4组合，

和/或SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：9组合，

和/或SEQ ID NO：8，，

和/或SEQ ID NO：10，

和/或SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：15组合，

和/或SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：17组合，

和/或SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16组合，

和/或SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：22组合，

和/或SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22组合，