[发明专利]1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖作为丝氨酸蛋白酶抑制剂及筛选方法和用途

说明书

本发明提供一种1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖，用于抑制丝氨酸蛋白酶活性，达到治疗肾病综合征的抗水肿的效果。同时提供一种筛选具有丝氨酸蛋白酶抑制活性的药效成分的方法，包括以下步骤：(1).分子对接技术对成分和靶点结合打分；(2).亲和‑超滤/超高效液相‑质谱联用技术检测提取液与含酶或不含酶超滤物的图谱变化及成分鉴定；(3).体外酶抑制活性的考察。本发明筛选出的1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖，经过计算机模拟、体外和体内实验验证，证实了1,2,3,4,6‑O‑五没食子酰葡萄糖具有抑制uPA和纤溶酶等丝氨酸蛋白酶的作用，改善水肿的特性，用于纤溶酶升高的疾病如肾病综合征等的治疗，在制备开发针对丝氨酸蛋白酶的抗水肿药物方面具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体为一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖作为丝氨酸蛋白酶抑制剂及筛选方法和用途。

背景技术

肾病综合征是常见的由肾小球疾病引起的一组临床综合症候群，包括微小病变肾病、局灶节段性肾小球硬化、膜性肾病和系膜增生性肾小球肾炎。其典型临床表现为大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿和高脂血症，其中大量蛋白尿和水肿是患者的主诉。其病程迁延，呈进行性发展，严重影响患者的生活质量。现在临床上主要采用糖皮质激素、血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂和免疫抑制剂治疗。这些药物虽然可以改善肾小球通透性，减少尿蛋白的漏出，但是激素类药物的长期给药所带来的副作用和依赖性给患者带来较大困扰。而针对肾病综合征水肿则主要采用利尿消肿药，但部分强效利尿药易出现血容量不足和电解质的紊乱。

肾病综合征水肿的发生机制复杂，目前没有单一的机制可以阐释其水肿原因。近年来发现，皮质集合管是原发性钠潴留的主要部位，在这一部位钠离子重吸收的关键途径是上皮钠离子通道(epithelial Na+ channel，ENaC)，当ENaC的细胞外结构域被蛋白酶修饰，可导致该通道的活化。

丝氨酸蛋白酶是一种种类丰富的蛋白分解酶类，其在凝血、补体及神经退行性疾病的病理生理学中发挥重要作用。纤溶酶作为纤溶系统的重要组成部分而被人们广为熟知，它能够降解纤维蛋白等蛋白。最新研究指出，ENaC可被纤溶酶裂解激活：蛋白尿疾病中肾小球滤过屏障受损，导致纤溶酶原和尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-typeplasminogen activator，uPA)异常过滤，在管腔中纤溶酶原经uPA激活生成纤溶酶，激活的纤溶酶可以蛋白水解切割γ-ENaC亚单位并释放抑制肽，导致ENaC激活，增加集合管内向电流，导致钠潴留。尿激酶/纤溶酶原系统在正常肾小球滤过屏障的生理发展和维持中并没有记录，然而，一旦该系统异常激活，将加速足细胞损伤，引起或加重蛋白尿。阿米洛利可抑制uPA和纤溶酶激活，抑制uPA受体表达，促进尿钠排泄。同样，一些丝氨酸蛋白酶抑制剂aprotinin、卡莫司他等显著降低肾病综合征大鼠γ-ENaC顶端靶向作用，抑制蛋白酶活性并阻止钠潴留。虽然丝氨酸蛋白酶抑制剂能有效改善动物模型水肿状态，但其临床应用还有一定局限，目前只有阿米洛利和卡莫司他应用于临床。因此，靶向丝氨酸蛋白酶抑制剂应用于肾病综合征的治疗具有巨大的发展潜力。现有的丝氨酸蛋白酶抑制剂大多是化学合成小分子，源于中药的丝氨酸蛋白酶抑制剂还少有报道。

发明内容

本发明以传统中医药理论和现代药理学为指导，基于中药来源，提供一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖作为丝氨酸蛋白酶抑制剂及筛选方法和用途，以解决上述背景技术中提出的问题。

本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖，用于抑制丝氨酸蛋白酶活性。

一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖，用于治疗肾病综合征。

一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖，用于治疗肾病综合征的抗水肿药物。

所述肾病综合征包括原发性肾病综合征和继发性肾病综合征。

一种1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖，用于抗水肿药物。