[发明专利]一种三相双探针荧光纳米乳示踪体系及制备、成像方法

权利要求书

1.一种三相双探针荧光纳米乳示踪体系制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

合成油相和水相，其中油相包括脂溶性探针，水相包括水溶性探针；

对所述油相和水相进行磁力搅拌，形成水相/油相型初乳；

在所述水相/油相型初乳中加入乳化剂和助乳化剂以及外水相形成水相/油相/水相双探针荧光纳米乳示踪体系。

2.根据权利要求1所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系制备方法，其特征在于，所述油相还包括肉豆蔻酸异丙酯、乳化剂和助乳化剂，所述水相还包括生理盐水。

3.一种三相双探针荧光纳米乳示踪体系制备方法，其特征在于，所述示踪体系包括：

油相包括脂溶性探针、肉豆蔻酸异丙酯、乳化剂和助乳化剂；

水相包括水溶性探针和生理盐水；

W/O型初乳,所述W/O型初乳由水相和油相通过磁力搅拌形成。

4.根据权利要求3所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系，其特征在于，所述乳化剂/助乳化剂添加质量比例为1:1-4:1，所述乳化剂为司盘-80与吐温-80以质量比为3:1-6:1混合，所述助乳化剂为异丙醇。

5.根据权利要求3所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系，其特征在于，所述示踪体系包括：

W/O初乳包括双荧光探针、乳化剂和助乳化剂；

外水相包括水溶性探针和生理盐水；

W/O/W型双探针荧光纳米乳，所述W/O/W型双探针荧光纳米乳是W/O初乳加乳化剂、组乳化剂和外水相通过磁力搅拌形成的。

6.根据权利要求5所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系，其特征在于，所述乳化剂/助乳化剂的添加量比例为1:1-3:1，所述乳化剂为吐温-80，所述助乳化剂为无水乙醇。

7.根据权利要求3或5所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系，其特征在于，所述示踪体系采用脂溶性荧光探针和水溶性荧光探针分别对纳米乳油相和水相进行标记。

8.根据权利要求3所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系，其特征在于，所述示踪体系在一定温度和转速下采用磁力搅拌形成具有“两膜三相”同心圆或类同心圆结构的水相/油相/水相双探针荧光纳米乳示踪体系。

9.根据权利要求3所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系，其特征在于，所述示踪体系由水相、油相、乳化剂和助乳化剂组成热力学稳定系统。

10.一种三相双探针荧光纳米乳示踪体系成像方法，其特征在于，所述成像方法基于如权利要求3-9任一所述的体系，所述成像方法包括如下步骤：

分别在脂溶性和水溶性两种荧光探针的激发波长和发射波长条件下进行纳米乳单通道荧光成像；

在双通道下观测并组合得到具有同心圆或类同心圆结构的W/O/W双探针荧光纳米乳示踪体系。

11.根据权利要求10所述三相双探针荧光纳米乳示踪体系成像方法，其特征在于，所述成像方法采用激光共聚焦显微镜并利用两个荧光通道在同一时间对同一区域的W/O/W纳米乳分别进行荧光成像，通过双色荧光叠加组合实时观测，观测到具有同心圆结构的双色荧光或不具有同心圆结构的单色点状、片状的游离状荧光探针或药物。