[发明专利]嵌合抗原受体(CAR)及其应用

说明书

本发明涉及嵌合抗原受体(CAR)及其应用。本发明提供了一种ROR1特异性嵌合抗原受体，包括信号肽、抗人ROR1 scFv、铰链区、跨膜区、4‑1BB胞内域和CD3ζ胞内域，其中抗人ROR1 scFv能够和目标抗原高亲和力结合，防止脱靶效益的发生，并且其热稳定和pH稳定性好，能够耐受极端环境；进一步的，在嵌合抗原受体中引入Fc片段，可提高肿瘤杀伤效果，防止免疫因子风暴产生，提高治疗的安全性和有效性；本发明中所提供嵌合抗原受体T细胞能够显著抑制乳腺癌、卵巢癌、肺癌等实体肿瘤细胞或组织生长，为相关药物的开发和肿瘤免疫治疗提供新的方案。

技术领域

本发明属于肿瘤免疫治疗领域和生物技术领域，具体提供了一种嵌合抗原受体(CAR)及其应用。

背景技术

肿瘤因其具有难治愈性、高死亡率、低愈后临床表现，而成为威胁人类健康的最严重的疾病之一，为此研究人员先后尝试了多种肿瘤治疗手段和技术，包括手术治疗、放射治疗、化学药物治疗、基因治疗等等，但是截至目前仍未找到行之有效的治疗手段。随着生物技术和免疫学研究的深入，肿瘤免疫治疗和抗肿瘤抗体受到业内的重视，自上世纪80年代以来，全球范围内已有上百种抗体并批准用于肿瘤治疗，以免疫检查点抑制剂和嵌合抗原受体T细胞为代表的新一代免疫治疗技术也得到广泛重视，并用于治疗多种恶性肿瘤。

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(receptor tyrosine kinase-like orphanreceptor1，ROR1)是受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase，RTKs)家族成员之一，与生长因子受体的酪氨酸激酶结构域具有很高的同源性。人ROR1分子由胞外区、跨膜区和胞内区组成，其胞外区包括一个免疫球蛋白样结构域(immunoglobulin-like domain，Ig-like)、两个富含半胱氨酸卷曲的结构域(cysteine-rich domain or frizzled，CRD orFZD)和一个kringle(KNG)结构域；胞内区含有一个酪氨酸激酶结构域(tyrosine kinasedomain，TKD)、两个富含丝氨酸/苏氨酸结构域(serine/threonines-rich domain，Ser/ThrD)和一个富含脯氨酸富集结构域(proline-rich domain，PRD)。大量研究显示ROR1在促进肿瘤的生长和转移、诱导肿瘤细胞耐药和抑制细胞凋亡等方面起到了关键性的作用，尤其是ROR1正常组织中低水平表达，而高表达于多种恶性肿瘤或组织中，如慢性淋巴细胞白血病(CLL)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、乳腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肺腺癌等等。ROR1在肿瘤组织中具有高度识别性，基于这种特性，使得ROR1成为一种新型的肿瘤特异性标志物和抗肿瘤靶点。