[发明专利]一种用于防治结肠癌的副干酪乳杆菌及其应用

说明书

本发明提供了一株副干酪乳杆菌及其相关产品，所述的副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌PC‑H1，保藏编号为CGMCC NO.22285，于2021年5月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明提供的副干酪乳杆菌PC‑H1制备的胞外囊泡具有抑制HCT116细胞、SW1116细胞以及SW620细胞的迁移和侵袭的能力，有效地诱导结肠癌细胞产生凋亡，并明显抑制裸鼠移植瘤的生长，有很好的临床应用前景。

技术领域

本发明属于微生物领域，具体涉及一种用于防治结肠癌的副干酪乳杆菌及其应用。

背景技术

结肠癌是常见的恶性肿瘤，由于人类高脂高糖食物摄入增多，膳食纤维摄入减少，以及超重人群的逐年增加，导致患结肠癌的风险呈增高的趋势。手术和化疗作为传统的抗癌疗法仍然是最有效的治疗策略，但对结肠癌的临床作用效果较差，并且接受化疗的患者多数会产生耐药性。因此，迫切地需要找到替代的抗癌药物来改善未来结肠癌的治疗。

益生菌尤其是乳酸杆菌在维护微生态平衡、多种疾病的预防和治疗中具有重要作用。益生菌属于天然的肠道微生物群，可以定植在人体肠道内并对其产生健康的功效。此外，益生菌可以通过促进肠道微生物群平衡，产生抗癌物质，降低肠道炎症以及减少有害酶产生的方式来预防和治疗结肠癌。

副干酪乳杆菌作为一种常见的益生菌，具有粘附的特性，可以以时间和剂量依赖的方式抑制结肠癌细胞的增殖。此外，副干酪乳杆菌细胞壁的肽聚糖成分可以诱导结肠癌细胞凋亡从而发挥抗癌作用。细菌胞外囊泡是一种由细胞释放到细胞外基质的膜性小囊泡，其直径范围为20-400nm，可以与免疫细胞相互作用以调节炎症反应；调节内皮细胞粘附分子的表达；刺激肠上皮细胞中紧密连接蛋白的表达来增强肠道屏障功能以及作为天然的纳米载体参与细胞间通讯。细菌胞外囊泡因其可修饰性，高效的装载量以及天然的肿瘤靶向性广泛应用于递送抗肿瘤药物的工具。益生菌释放的胞外囊泡可以与宿主相互作用从而进行细胞间通讯。已有研究发现副干酪乳杆菌胞外囊泡通过增强内质网应激的方式来减轻葡聚糖硫酸钠诱导的急性结肠炎小鼠的炎症程度。目前有关副干酪乳杆菌胞外囊泡的研究还主要集中在治疗胃肠道炎症方面。

中国专利201910799557.9中公开了一种副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei，MIT-16)及其在犬肿瘤免疫治疗过程中的应用。从小鼠肠道中分离、筛选到1株产酸能力较高的副干酪乳杆菌MIT-16，该菌具有较好的耐酸性能和较强的抑菌能力，并且具有显著的免疫调节功能，尤其对肿瘤治疗中的免疫反应调节具有重要作用。所述菌株可用作免疫调节生物治疗剂。但该发明提供的菌株应用于抑制肿瘤时需要与CAR-T细胞联用，增加了施用难度。

中国专利201980087214.8中公开了一种用于预防或治疗炎症疾病或癌症的药物组合物，所述药物组合物包含衍生自副干酪乳杆菌的细胞外囊泡作为活性成分。但其在小鼠抗癌作用实验中表现出的药效较差，有进一步优化的空间。

发明内容

为了解决上述问题，本发明从健康人肠道中分离了120株乳酸菌，并从中筛选出既能具有抗结肠癌活性的副干酪乳杆菌；此副干酪乳杆菌研制乳杆菌活菌制剂，具有安全、可靠、不良反应少、效果好等优点，能够抑制结肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭，有益于人体健康。

一方面，本发明提供了一株微生物。

所述的微生物为副干酪乳杆菌PC-H1，分类命名为Lactobacillus paracasei PC-H1，保藏编号为CGMCC NO.22285，于2021年5月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

本发明提供的副干酪乳杆菌PC-H1筛选自临床检测无肠道炎症及肿瘤等体征的健康人粪便样品，分离后经菌落形态鉴定，结果如下：大小约0.5-1.0mm,菌落边缘整齐，有凸起，革兰染色呈阳性，显微镜下细胞形态多为短杆状，大小形态稳定。