[发明专利]一种防治禽产气荚膜梭菌的研发方法

说明书

本发明涉及生物抗菌剂技术领域，且公开了一种防治禽产气荚膜梭菌的研发方法，包括以下步骤：S1：菌种活化，收集挑选优良菌种，按照不同保藏温度的保藏期限定期将菌种放入活化桶中进行活化；S2：培养基培养，把活化有的菌种放在液体培养基中培养，在液体培养基中培养时首选选择基础培养基，然后对基础培养基进行营养强化后使用；S3：离心收集菌体。本发明能够有效防治NE，提高饲料转化率的生物抗菌制剂，通过与噬菌体cocktail的联用，为动物的生态健康养殖提供新的途径，能够建立基于噬菌体及益生菌的生物防控体系，制定合理的抗菌联用方案，减少抗生素使用，防止耐药菌的产生，建立可持续性动物福利。

技术领域

本发明涉及生物抗菌剂技术领域，具体为一种防治禽产气荚膜梭菌的研发方法。

背景技术

细菌耐药是大健康下的关注热点，如何减少抗生素，有效控制细菌病都将势在必行，噬菌体因其特异而不易产生抗性等优势，必将是生物源抗菌药物的首选，通过本项目的实施，能够有效的将耐药性Cp进行比对，获取更多的耐药相关信息，从而为全面解决家禽养殖模式下产生的耐药问题提供支撑，在此基础上开发出能够高效抵御Cp的噬菌体产品用于NE的防治，目前在世界范围内为首例，为全球大健康的发展提供可持续发展方案。

目前尚未有噬菌体产品上市销售，而且对噬菌体不能有效应用，传统抗生素随时间出现衰减，不够高效和持久，不能满足人们的要求，因此提出一种防治禽产气荚膜梭菌的研发方法。

发明内容

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种防治禽产气荚膜梭菌的研发方法，解决了对噬菌体不能有效应用，传统抗生素随时间出现衰减，不够高效和持久，不能满足人们的要求的问题。

(二)技术方案

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种防治禽产气荚膜梭菌的研发方法，包括以下步骤：

S1：菌种活化，收集挑选优良菌种，按照不同保藏温度的保藏期限定期将菌种放入活化桶中进行活化；

S2：培养基培养，把活化有的菌种放在液体培养基中培养，在液体培养基中培养时首选选择基础培养基，然后对基础培养基进行营养强化后使用；

S3：离心收集菌体，在培养基培养后对其进行离心处理，然后收集菌体；

S4：制备悬浮液，把离心后的菌体加入混合罐中，然后加入保护剂，制备悬浮液；

S5：分装，把制备的悬浮液进行分装，分装时对包装瓶进行紫外线杀菌处理；

S6：冷冻干燥，把分装后的物料放入冷冻室内冷冻干燥；

S7：建立模型，建立噬菌体cocktail及益生菌制剂的动物模型，进行临床试验及评估；

S8：试验，将噬菌体cocktail及益生菌制剂联合应用于规模化禽养殖场NE的预防和治疗，评价其抗菌效果及防治NE的保护性效果。

作为本发明再进一步的方案，所述S1中通过宏基因组分析禽NE的病原菌群数据信息，分析家禽养殖中Cp菌群特征及致病特性。

进一步的，所述S2中基础培养基为NB液体培养基，在对基础培养基进行营养强化时加入40ml质量分数为0.85％的生理盐水，置于22-36℃培养5-18小时。

在前述方案的基础上，所述S3中离心时转速为800-1800r/min，离心时间为2-4分钟。

进一步的，所述S4中数显加入菌体，然后置于70-80℃，浓度为2-6％的碱溶液中，然后用去离子水和酸溶液反复冲洗，然后置于打浆机内，形成乳浊液；然后置于离心机内，获得悬浮液。