[发明专利]用于预测和筛选青少年特发性脊柱侧凸的试剂盒及应用

说明书

本发明提供了一种用于预测和筛选青少年特发性脊柱侧凸的试剂盒，包括检测TTN基因突变和/或表达水平的试剂。通过检测TTN基因的突变情况，来对人群罹患AIS疾病情况进行预测及筛选，以提前进行相关预防，显著降低疾病对人体健康的损害，同时也有助于对已患病患者进行预后评估，为治疗及康复提供合理有效的指导作用；由于AIS疾病存在明显的家族遗传相关性，因而可利用TTN基因检测结果为受试者及其家庭提供优生优育指导和遗传质询，减少相关患儿的出生；除此以外，还可以为人类攻克AIS提供一个新的药物治疗靶点，从而为后续的药物研发、临床治疗等提供了一个新的方向。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及用于预测和筛选青少年特发性脊柱侧凸的试剂盒及其应用。

背景技术

青少年特发性脊柱侧凸（Adolescent Idiopathic Scoliosis，AIS）是指在青少年期间出现的脊柱的一个或多个节段在冠状面上偏离身体中线向侧方弯曲而形成的一个带弧度的脊柱畸形，通常伴有脊柱的侧凸和矢状面上的前突或后突的增加或减少，在10-18岁的青少年中其发病率约为1%-3%，女孩较男孩更常见，是青少年最常见的脊柱畸形之一。

青少年特发性脊柱侧凸是特发性脊柱侧弯最常见的类型，占脊柱侧弯的0.47-5.2%，占特发性脊柱侧弯90%。AIS的病因尚不明确,可能与家族基因遗传、褪黑素水平、血小板的结构和功能等因素相关。目前认为AIS的病因可能是多因素导致的。目前，流行病学表明AIS有家族聚集性。Andersen研究双胞胎特发性脊柱侧弯发病率发现：同卵双胞胎的一致率在73%-92%，异卵双胞胎的一致率在36%-63%，并且认为基因遗传是AIS的发病之一。分子生物学技术的发展，全外显子测序辅助临床诊断成为可能。因此有学者利用基因筛查及候选基因的方法从发病患者中找到发病基因。Kris通过大样本(共202个家族1198人)利用基因筛查的方法也发现染色体19p13存在异常，然而并没有实质性进展。

目前的研究对于AIS发病机制还不是十分清楚。遗传因素在AIS的发病中发挥着不可忽视的作用。一些以双胞胎和AIS家系为基础的研究表明遗传因素对AIS的发生和发展起着重要的影响。2003年，Justice等人的研究提出了AIS的常染色体显性遗传模式。尽管目前已经有一些研究证实遗传的基因突变对AIS发病和发展的影响，但是仍不能完整的解释AIS的遗传机制并指导治疗。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术中所存在的青少年特发性脊柱侧凸发病因素不明确、难以进行提前预防的技术问题，从而提供了一种用于预测和筛选青少年特发性脊柱侧凸的试剂盒。通过选择TTN作为标志物，能够用于对青少年特发性脊柱侧凸进行有效预测，从而筛选出AIS的高发病人群，以进行合理的提前预防，显著降低疾病发生的概率及严重程度，减少对人体健康的损害。

为了解决上述技术问题，本发明是通过如下技术方案得以实现的。

本发明第一方面提供了一种用于预测和/或筛选青少年特发性脊柱侧凸的试剂盒，包括检测TTN基因突变和/或表达水平的试剂。

作为优选地，所述TTN基因突变的位点选自以下位点中的一种或多种：c.G178T、c.T455C、c.G4322C、c.G22498T、c.G31864A、c.G36508A、c.C51482T、c.G76343A、c.C91276T、c.A98164T、c.G100579A、c.G102833T、c.C105782T、c.T107267C。最优选地，所述TTN基因突变的位点选自c.G4322、c.C91276T、c.G102833T中的一种或多种。

作为优选地，所述试剂选自基因特异性引物、基因组测序试剂、基因表达产物的特异性抗体中的一种或多种。

作为优选地，所述基因特异性引物选自下列引物对中的至少一对：

（1）引物对1：正向引物序列如SEQ ID NO:1所示，反向引物序列如SEQ ID NO:2所示；