[发明专利]一种长链非编码RNA及其应用有效

专利信息
申请号: 202111358287.1 申请日: 2021-11-15
公开(公告)号: CN114134146B 公开(公告)日: 2022-06-14
发明(设计)人: 刘健;文建庭;万磊;王馨;王杰 申请(专利权)人: 安徽中医药大学第一附属医院(安徽省中医院)
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12Q1/6883;A61K31/7105;A61P29/00;A61P19/02;A61P19/06
代理公司: 合肥辉达知识产权代理事务所(普通合伙) 34165 代理人: 汪守勇
地址: 230031 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要:
搜索关键词: 一种 长链非 编码 rna 及其 应用
【说明书】:

发明提出一种长链非编码RNA及其应用,属于风湿病分子生物学领域。lncRNA MAPKAPK5‑AS1的cDNA序列如SEQ ID No:1所示。长链非编码RNA以及miR‑146a‑3p作为分子干预靶点可以应用在调控细胞炎症反应和凋亡不足中,miR‑146a‑3p序列如SEQ ID No:2所示。本发明利用全转录高通量测序技术分析类风湿关节炎患者获得一种与细胞炎症反应和凋亡不足密切相关的lncRNA MAPKAPK5‑AS1,可发挥miRNA分子海绵样作用,竞争性结合miR‑146a‑3p,从而拮抗miRNA的功能,抑制SIRT1基因的表达,促进细胞炎症反应和抑制细胞凋亡。

技术领域

本发明属于风湿病分子生物学领域,涉及一种长链非编码RNA及其应用。

背景技术

长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncNA)是一种长度>200nt的调节性非编码RNA,过去被认为是一种转“噪声”、“暗物质”,没有编码蛋白质能力。近年来许多研究表明,lncRNA可以在表观遗传、转录、转录后水平,也可以发挥海绵样作用,竞争性结合微小RNA(microRNA,miRNA),影响靶基因的表达,调节下游通路,参与多种疾病的进展。

成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synovial cells,FLS)是一种炎性细胞,是滑膜细胞的主要组成部分,分泌大量炎性细胞因子,长期的炎症刺激会导致关节肿痛、畸形、功能丧失等。炎性信号的刺激可以使FLS异常增殖、凋亡不足,从而产生多种炎性细胞因子,产生的炎性因子又不断地激活FLS,两者相互促进,形成恶性循环。免疫炎症反应和细胞凋亡不足与多种风湿病发病有关,例如类风湿关节炎、骨关节炎、强直性脊柱炎和痛风性关节炎等。因此,研究发现与细胞炎症和凋亡相关的lncRNA具有很大的临床应用价值。

发明内容

本发明利用全转录高通量测序技术分析RA患者lncRNAs,获得一种与细胞炎症反应和凋亡不足有关的lncRNA MAPKAPK5-AS1,有潜力成为抑制风湿病患者滑膜炎症反应和促进滑膜细胞凋亡的新靶点。

本发明的所采用的具体技术方案为:一种长链非编码RNA,为lncRNA MAPKAPK5-AS1,其cDNA序列如SEQ ID No:1所示。

本发明另一目的在于提供上述长链非编码RNA以及miR-146a-3p作为分子干预靶点在调控细胞炎症反应和凋亡不足中的应用,miR-146a-3p序列如SEQ ID No:2所示。

本发明所述长链非编码RNA作为miRNA分子海绵特异性结合miR-146a-3p,从而抑制miRNA的功能;miR-146a-3p功能受到抑制后能够促进SIRT1基因的表达,从而对细胞炎症反应和凋亡不足进行调节。

本发明另一目的在于提供所述长链非编码RNA以及miR-146a-3p作为分子干预靶点在制备治疗与细胞炎症反应和凋亡不足有关风湿病的药物中的应用。

所述与细胞炎症反应和凋亡不足有关的风湿病包括类风湿关节炎、强直性脊柱炎、骨关节炎或痛风性关节炎。

本发明一项具体的研究应用,长链非编码RNA作为分子干预靶点在抑制成纤维样滑膜细胞炎症反应、促进成纤维样滑膜细胞凋亡的药物中的应用。

本发明利用利用全转录高通量测序技术分析RA患者中得到30个差异表达的lncRNAs,其中本发明所述lncRNA MAPKAPK5-AS1在RA患者中表达下调。RT-qPCR证明lncRNAMAPKAPK5-AS1表达变化与高通量测序结果一致,在成纤维样滑膜细胞(FLS)的表达趋势与PBMCs中一致。RACE反应得到lncRNA MAPKAPK5-AS1的全长序列,位于12q24.12-q24.13。亚细胞定位分析lncRNA MAPKAPK5-AS1主要表达于FLS的细胞质中。

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