[发明专利]一种癌细胞分析基因电路组件及其制备方法

权利要求书

1.一种癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，包括至少两种癌细胞分析基因电路，每种所述癌细胞分析基因电路分别针对不同的癌细胞状态且并联连接；

每种所述癌细胞分析基因电路至少包括依次连接且与所针对的癌细胞状态对应的正向合成启动子、条形码区域和负向合成启动子，所述正向合成启动子包含所述癌细胞状态下的癌细胞具备的正向增强子，所述负向合成启动子包含所述癌细胞状态下的癌细胞具备的负向增强子。

2.如权利要求1所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，所述正向合成启动子的蛋白结合区域单一。

3.如权利要求1所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，所述负向合成启动子的蛋白结合区域单一。

4.如权利要求1所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，在所述负向合成启动子的下游端还包括荧光蛋白序列。

5.如权利要求4所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，所述荧光蛋白序列为EYFP荧光蛋白序列。

6.如权利要求4或5所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，所述荧光蛋白序列的下游端还依次连接有正向合成启动子、条形码区域和负向合成启动子。

7.如权利要求1所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，每种所述癌细胞分析基因电路包括依次连接的3'UTR段、荧光蛋白序列、Lac启动子、正向合成启动子、条形码区域、CMV启动子、mScarlet序列、WPRE、负向合成启动子、Lac终止子和3'UTR段，且每种所述癌细胞分析电路中的所述正向合成启动子所包含的正向增强子和负向合成启动子所包含的负向增强子均来自于对应的所述癌细胞状态下的癌细胞。

8.如权利要求1所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，所述条形码区域的序列如SEQ ID NO.1所示。

9.如权利要求1所述的癌细胞分析基因电路组件，其特征在于，所述癌细胞状态为MHCC97H系癌细胞的高侵袭型细胞状态、细胞骨架重组活跃型细胞状态、高干性型细胞状态、高分化型细胞状态、快分裂周期型细胞状态、慢分裂周期型细胞状态、免疫逃逸型细胞状态、抗凋亡型细胞状态中的至少两种。

10.权利要求1-9任一项所述的癌细胞分析基因电路的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：分别获取至少两种癌细胞状态下的癌细胞的正向增强子和负向增强子；

步骤2：基于每种所述癌细胞状态对应的所述正向增强子和所述负向增强子获得正向合成启动子和负向合成启动子；

步骤3：获取条形码区域，将所述正向合成启动子、所述条形码区域和所述负向合成启动子依次相连,即获得癌细胞分析基因电路。