[发明专利]一种红尾松的组织培养与快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种红尾松的组织培养与快速繁殖方法，包括如下步骤：S1、外植体的采集与预处理，S2、外植体的消毒，S3、不定芽的诱导培养，S4、增值培养，S5、生根培养，S6、炼苗和移栽；本发明通过对外植体的选取与预处理、诱导培养基、增殖培养基及生根培养基的选取，使得芽的分化率高达95％以上，生根率95％以上，成活率达到95％以上；采用本发明所述方法可以不受季节、温度和地域影响，可以生产大量的红尾松无菌苗，通过对红尾松无菌繁殖体系的建立，并为后续红尾松大规模培育提供理论基础和技术支持；同时，生根苗经炼苗后，移栽到含有专用水溶性肥料的水培液中，使得植株极易成活，并且能培育出红色的红尾松。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种红尾松的组织培养与快速繁殖方法。

背景技术

红尾松属于千屈菜科(Lythraceaea)，学名为Rotala wallichii。红松尾分布于东南亚地区，水中叶呈针形，其为双子叶植物，挺水性水草，水上草与水中草有着较大的差异，水上草呈绿色，8～10枚叶片轮生，叶片呈针形(松尾类水草的特征)，叶质坚硬挺拔，水中草顶叶呈现红色，但是下半部分常常呈现棕绿色，10～13枚叶片轮生，叶片呈长针形，但叶质较为柔软，常常在顶部开花，花絮为穗状花絮，淡桃红色花。

红尾松可用播种、扦插、分株等方法繁殖，但以扦插、分株为主，扦插应在生长旺期6～8月进行，剪取嫩枝长7～10厘米，去掉基部三分之一的叶子插入无底洞装有鲜塘泥的盆中，6～10天生根，易成活；但上述繁殖方法需要在特定的时期采用特定的方法进行培育，不利于大规模的工业化生产，同时，目前关于红尾松的组织培养几乎没有文献报道。

有鉴于此，本发明提出一种红尾松的组织培养与快速繁殖方法来解决上述技术问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种红尾松的组织培养与快速繁殖方法。

为解决现有技术中的上述问题，本发明是通过如下技术方案来实现的：

一种红尾松的组织培养与快速繁殖方法，包括如下步骤：

S1、外植体的采集与预处理：选取生长健壮、无病虫害的红尾松茎段作为外植体，经清洗、乙醇擦拭、去除多余附着物后，再进行超声清洗，之后用无菌水清洗后，得到预处理的外植体；

S2、外植体的消毒：将步骤S1中得到的预处理的外植体置于无菌操作台中，经乙醇浸泡、升汞浸泡、无菌水冲洗后，切割成至少带一个腋芽或顶芽的茎段，之后用无菌滤纸吸干表面水分，得到消毒的外植体；

S3、不定芽的诱导培养：将步骤S2中得到的消毒的外植体接种于无菌的诱导培养基中，然后在光照培养箱中进行诱导培养，得到不定芽；

S4、增值培养：将步骤S3中得到的不定芽接种到无菌的增殖培养基中，然后在光照培养箱中进行增殖培养，得到丛生苗；

S5、生根培养：将步骤S4中得到的丛生苗接种到无菌的生根培养基中，然后在光照培养箱中进行生根培养，得到生根苗；

S6、炼苗和移栽：将步骤S5中得到的生根苗移出光照培养箱，在室温条件下放置炼苗2～5天；然后将植株从培养基中取出，并去除植株根部的培养基，移栽于带有水溶性肥料的水培液中。

进一步地，步骤S1中，所述外植体先用自来水冲洗1～2h，之后用浸泡70～80％乙醇的棉球擦拭2～4次，并去除不定根、叶片等附着物后，然后置于超声波清洗器中，在20～25℃的温度条件下处理15～25min，最后用无菌水清洗4～6次，得到预处理的外植体。

进一步地，步骤S2中，所述预处理的外植体先用70～80％乙醇充分浸泡45～60s，立即用无菌水冲洗3～5次，然后用0.1％升汞充分浸泡3～6min，立即用无菌水冲洗4～6次，所述茎段的长度为1.5～3cm。