[发明专利]环状RNA cGGNBP2的用途

说明书

本发明公开了环状RNA cGGNBP2的用途，基于发明人对环状RNA cGGNBP2(CircBase ID：hsa_circ_0003930)在肝胆管癌细胞生长和转移中的功能和机制研究，提供一种诊断肝内胆管细胞癌的试剂盒、治疗肝内胆管细胞癌的药物组合物，以及环状RNA cGGNBP2作为治疗靶点在肝内胆管细胞癌的预后、诊断和治疗中的应用。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及环状RNA cGGNBP2在诊断、治疗肝内胆管细胞癌，以及肝内胆管细胞癌预后中的应用。

背景技术

肝内胆管细胞癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma，ICC)约占原发性肝癌的15％～20％，近年来发病率显著上升。高转移率和术后快速复发导致了肝内胆管细胞癌的预后较差。增强对关键促癌事件的认知将有助于开发新型有效的以转移为靶向的治疗方法，并改善肝内胆管细胞癌患者的预后。

目前，炎症与癌症之间的关系受到了广泛关注。白细胞介素(IL)-6，一种在炎症刺激存在的情况下产生的多效性细胞因子，在肿瘤发生和癌症进展中发挥着重要的作用。肿瘤微环境中慢性炎症所导致的IL-6的异常表达可以通过激活下游信号通路来促进肿瘤细胞的生长和转移。

环状RNA(circRNAs)是一类不具有5’末端帽子和3’末端poly(A)尾巴，且以共价键形成的环形结构的非编码RNA。由于环状RNA呈封闭式的环状结构，不易被RNase R酶消化，相较于线性RNA能够更稳定地存在于生物体中。越来越多的研究证明环状RNA在许多类型的癌症中存在异常表达且发挥重要作用。

环状RNA cGGNBP2(CircBase ID:hsa_circ_0003930)包含基因GGNBP2的第3个至第6个外显子，其环化的核苷酸序列有548个碱基，目前尚未有任何关于环状RNA cGGNBP2在诊断、治疗肝内胆管细胞癌，以及肝内胆管细胞癌预后中应用的报道。

发明内容

cGGNBP2(CircBase ID:hsa_circ_0003930)的cDNA序列如SEQ ID NO：1所示，cGGNBP2的序列如SEQ ID NO：2所示。cGGNBP2的结构为SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列首尾连接而成的环状结构。

越来越多的研究证明炎症与癌症的进程有关，白细胞介素IL-6在多种肿瘤中过表达并调节增殖、侵袭、转移等癌症功能特征。发明人通过实验研究发现，血清IL-6水平升高与肝内胆管细胞癌更具侵袭性的肿瘤特征和不良预后显著相关，IL-6能够诱导环状RNA的表达以促进肝内胆管细胞癌的进程。通过分析华西医院136例ICC患者的肿瘤组织和相匹配的非肿瘤组织发现cGGNBP2在肿瘤组织中的表达水平明显高于非肿瘤组织，表明其在ICC的发生发展中可能发挥重要作用。接下来，通过研究cGGNBP2的表达水平与临床病理特征、以及患者预后之间的关系发现，cGGNBP2的表达水平升高为总生存期(Overall Survival，OS)和无复发生存率(Recurrence-Free Survival，RFS)的独立危险因素，表明受IL-6刺激而上调的cGGNBP2的表达水平可以作为ICC患者的重要的预后指标之一。此外，通过体外实验发现，cGGNBP2敲低能够显著地抑制细胞的生长、迁移和侵袭能力，而cGGNBP2的过表达将提升细胞的生长、迁移和侵袭能力；通过体内实验发现，cGGNBP2敲低后可以抑制肿瘤的生长、肝内转移和肺转移，而过表达的cGGNBP2将加速肿瘤的生长、肝内转移和肺转移。