[发明专利]一种鉴定葡萄无核性状的KASP标记与应用

说明书

本发明公开了一种鉴定葡萄无核性状的KASP标记与应用，该KASP分子标记的SNP位点位于葡萄基因组PN40024第18号染色体第26889437位碱基，具有A/C多态性。本发明的KASP分子标记引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示，采用该引物组通过KASP技术进行PCR反应和荧光检测，根据FAM、HEX两种不同荧光的峰值大小，绘制聚类图，判定待测样品的基因型；若待测样品的基因型为A：C，则该葡萄表现为无核性状，若该位点基因型为C：C，葡萄种子表现为有核，以此标记开展葡萄无核分子辅助育种，可以大大提高育种进程。

技术领域

本发明涉及一种鉴定葡萄无核性状的分子标记，具体涉及一种鉴定葡萄 无核性状的KASP标记与应用。

背景技术

无核葡萄由于常规育种周期长，且无法获得稳定遗传的种子，导致无核 葡萄的育种进度缓慢。通过无核葡萄分子标记，在苗期进行辅助选择，可有 效提高葡萄育种效率、降低育种成本，因此开发准确性高、通用性广的无核 分子标记对于无核葡萄育种具有重要的意义。

目前，研究人员针对葡萄无核性状开发了SCAR(Sequence CharacterizedAmplified Region，序列特征扩增区)、RAPD(Random amplified polymorphic DNA，随机扩增多态性DNA标记)、SSR(Simple Sequence Repeats，简单 重复序列)、SNP(SingleNucleotide Polymorphism，单核苷酸多态性)等多 种标记类型。现有技术具体如下：

(1)LAHOGUE等(1998)和MEJIA等(2003)通过BSA(Bulk Segregant Analysis，集群分离分析法)分别开发了与SDI(Seed Development Inhibitor， 种子发育抑制)位点连锁不平衡(Linkage Disequilibrium，LD)的SCAR标 记SCC8-1080和SCF27-2000，MEJIA等(2003)还研究证明这两个标记更 适合应用于双亲均为无核的后代群体。

(2)王跃进等(2002)以‘无核白’为试材，开发出1个GSLP1-569 特异的RAPD标记，LI等(2015)和LI等(2018)的研究证明GSLP1-569 标记仅适合于对‘无核白’及其亲缘关系较近的无核品种的分子检测。

(3)PELLERONE等(2001)开发了SSR标记VMC7f2，CABEZAS 等(2006)和ROYO等(2018)利用不同的杂交群体进行QTL分析认为 VMC7f2分子标记的198bp等位点与无核性状显著关联，但VMC7f2标记在 不同遗传背景下有效性会明显不同(MEJIA et al.2011；AKKURT et al.2012)。