[发明专利]一种海参活性肽及其制备方法有效
| 申请号: | 202111315874.2 | 申请日: | 2021-11-08 |
| 公开(公告)号: | CN113861272B | 公开(公告)日: | 2023-03-24 |
| 发明(设计)人: | 刘会平;蒋泽根;乐国伟;施用晖 | 申请(专利权)人: | 时代生物科技(深圳)有限公司;江南大学(扬州)食品生物技术研究所 |
| 主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C12P21/06 |
| 代理公司: | 深圳市精英专利事务所 44242 | 代理人: | 曹祥波 |
| 地址: | 518000 广东省深圳市龙岗区横岗街*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 海参 活性 及其 制备 方法 | ||
1.一种海参活性肽,其特征在于,所述海参活性肽由以下序列中的一种或多种组成:序列1:G-Hyp-LQADY,甘氨酸-羟脯氨酸-亮氨酸-谷氨酰胺-丙氨酸-天冬氨酸-酪氨酸,序列2:FD-Hyp-GA,苯丙氨酸-天冬氨酸-羟脯氨酸-甘氨酸-丙氨酸,序列3:LPGSDDF,亮氨酸-脯氨酸-甘氨酸-丝氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸,序列4:APGLTY,丙氨酸-脯氨酸-甘氨酸-亮氨酸-苏氨酸-酪氨酸,序列5:GNFGGLP,甘氨酸-天冬酰胺-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸-亮氨酸-脯氨酸,序列6:APLGF,丙氨酸-脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸。
2.一种制备如权利要求1所述的海参活性肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将海参泡发,并进行均质前处理得到原料蛋白;
将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物;
将海参肽酶解产物进行超滤膜过滤,截留所需分子量的截留液;
将截留液进行大孔树脂201分离,并进行梯度洗脱,收集洗脱峰,得到洗脱液;
测定洗脱液的DPPH,并选择高DPPH的组分;
采用RP-HPLC反相高效液相色谱将高DPPH的组分进行分离、纯化;
将分离、纯化的洗脱液进行减压浓缩、冻干得到海参活性肽;
其中,所述将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物步骤中,采用复合蛋白酶酶解,所述复合蛋白酶包括:碱性蛋白酶,胰蛋白酶和中性蛋白酶,所述碱性蛋白酶,胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比例为(0.5-1):(1-2):(1-2),所述碱性蛋白酶的酶活为50,000-500,000U/g,所述胰蛋白酶的酶活为100,000-1,000,000U/g,所述中性蛋白酶的酶活为100,000-650,000U/g,所述将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物步骤中,复合蛋白酶与原料蛋白的用量质量比为0.4-0.9%,料液质量比为5-15%,所述将原料蛋白进行酶解得到海参肽酶解产物步骤中,酶解温度为37-50℃,酶解时间为3-7小时,所述将海参肽酶解产物进行超滤膜过滤,截留所需分子量的截留液步骤中,超滤膜采用孔径为3000道尔顿超滤膜,收集的截留液为分子量大于3000的截留液,所述将截留液进行大孔树脂201分离,并进行梯度洗脱,收集洗脱峰,得到洗脱液步骤中,分级梯度洗脱液为浓度为60%、70%,75%,80%,85%,90%乙醇,洗脱峰在280nm下进行检测。
3.根据权利要求1所述的海参活性肽的制备方法,其特征在于,所述复合蛋白酶与原料蛋白的用量质量比还可以替换为0.1-0.2%,所述复合蛋白酶的酶活为80,000-250,000U/g,酶解温度为50-60℃,酶解时间0.5-1h。
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